再生障碍性贫血患者外周血CD4+CD25+Tregs细胞、T-bet mRNA和IL-21表达研究

来源 :蚌埠医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiuxi1984
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目的:检测再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA,再障)患者外周血单个核细胞(peripheral blood monouclear cells, PBMCs)中 CD4+CD25+Treg细胞(CD4+CD25+regulatory T cell,CD4+CD25+调节性T细胞)比例、Foxp3和T-bet mRNA表达水平、血浆白介素-21(interleukin-21,IL-21)和干扰素-γ(interferon-γ, IFN-γ)的水平,初步探讨CD4+CD25+Treg细胞、Foxp3 mRNA、T-bet mRNA、IL-21和IFN-γ的表达与AA免疫病理学和AA患者预后的关系。  方法:流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测30例初发AA患者、11例治疗后处于恢复期的AA患者和10例治疗后未处于恢复期的AA患者的PBMCs中CD4+CD25+Treg细胞比例;半定量RT-PCR检测21例初发AA患者、5例治疗后处于恢复期的AA患者和6例治疗后未处于恢复期的AA患者的PBMCs中Foxp3和T-bet mRNA表达水平;ELISA法检测24例初发AA患者血浆IL-21、IFN-γ水平。对照组为20例健康体检者和健康志愿者,相同的方法检测以上项目。  结果:①CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25highT细胞、CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞的比例:在30例初发AA患者中分别为(13.31±3.97)%、(1.09±0.41)%、(0.98±0.39)%,在11例治疗后处于恢复期的AA患者中分别为(12.86±3.61)%、(1.31±0.42)%、(1.27±0.31)%,在10例治疗后未处于恢复期的AA患者中分别为(11.70±5.12)%、(1.19±0.51)%、(1.12±0.37)%,在20例的正常对照中分别为(11.98±2.71)%、(1.47±0.32)%、(1.23±0.26)%。四组样本间CD4+CD25+T细胞比例无明显差异(P均>0.05),初发 AA患者的CD4+CD25highT细胞和CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例明显低于正常对照组(P<0.05),与治疗后处于和未处于恢复期的AA患者比较,无明显差异(P>0.05),治疗后处于和未处于恢复期的AA患者间CD4+CD25highT细胞和CD4+CD25+Foxp3+T细胞比较也无明显差异(P>0.05)。②Foxp3 mRNA在21例初发AA患者、5例治疗后处于恢复期的AA患者、6例治疗后未处于恢复期的AA患者和正常对照组的表达分别为(0.22±0.10)、(0.39±0.21)、(0.31±0.15)和(0.36±0.12),初发AA患者的Foxp3 mRNA表达明显比正常对照组低(P<0.01),与治疗后处于和未处于恢复期的AA患者比较,无明显差异(P>0.05),治疗后处于和未处于恢复期AA患者的Foxp3 mRNA表达也无明显差异(P>0.05)。T-bet mRNA在21例初发AA患者、5例治疗后处于恢复期的AA患者、6治疗后未处于恢复期的AA患者和正常对照组的表达分别为(0.42±0.11)、(0.27±0.13)、(0.44±0.10)和(0.32±0.08),初发AA患者的T-bet mRNA表达明显高于正常对照组(P<0.01),治疗后未处于恢复期的AA患者T-bet mRNA表达明显高于正常对照组(P<0.05),与初发AA患者比较无明显差异(P>0.05),治疗后处于恢复期的AA患者T-bet mRNA表达低于初发AA患者(P<0.05),而与正常对照组比较无明显差异(P>0.05)。③24例初发AA患者血浆IFN-γ和IL-21的浓度分别为(50.95±17.52)pg/ml和(69.43±27.45) pg/ml,20例的正常对照血浆 IFN-γ和 IL-21的浓度分别为(39.18±10.10)pg/ml和(53.96±19.70)pg/ml。初发AA患者血浆IFN-γ和IL-21的水平明显高于正常对照组(P<0.05)。  结论:①CD4+CD25+Foxp3+T细胞数量和 Foxp3 mRNA表达下降是 AA患者免疫耐受打破的原因之一。②AA患者T-bet mRNA和IFN-γ表达升高,提示T-bet和IFN-γ表达异常在AA的免疫病理学中发挥一定的作用。③对AA患者而言,IL-21可能作为一种造血负性调节因子而起作用。
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