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本文主要从以下几个方面进行论述： 第一部分 载STAT3诱骗寡核苷酸阳离子固体脂质纳米粒的制备及表征 目的: 1.制备空白阳离子固体脂质纳米粒(SLN)并检测其粒径、表面电位、稳定性等特征。 2.探讨SLN对卵巢癌细胞的细胞毒性。 3.制备载STAT3诱骗寡核苷酸阳离子固体脂体纳米粒(SLN-STAT3 decoy ODN)。检测其粒径、表面电位等特征。 方法: 1.采用单硬脂酸甘油酯和卵磷脂为脂质材料，以十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）为表面活性剂，采用溶剂扩散法制备空白SLN。 2.将制备的SLN与适当比例的STAT3 decoy ODN复合，制备SLN-STAT3 decoyODN，采用琼脂糖凝胶阻滞分析法验证SLN-STAT3 decoy ODN的形成。 3.采用透射电镜观察SLN和SLN-STAT3 decoy ODN的形态特征，采用DelsaTMNano粒度测定仪测定其粒径和表面电位。 4.采用MTT法检测SLN对卵巢癌细胞系SKOV3和A2780的细胞毒性。 结论: 1.成功制备了SLN载体体系和SLN-STAT3 decoy ODN复合物。 2.SLN生物安全性好，对卵巢癌细胞SKOV3和A2780无明显的细胞毒性。 第二部分 SLN-STAT3 decoy ODN复合物靶向阻断STAT3对人卵巢癌细胞体外抑制作用及机制研究 目的: 1.检测卵巢癌细胞对SLN-STAT3 decoy ODN的摄取能力。 2.检测SLN-STAT3 decoy ODN在体外对卵巢癌细胞的生长抑制作用。 3.探讨SLN-STAT3 decoy ODN在体外对卵巢癌细胞凋亡、自噬和侵袭迁移能力的影响。 方法: 1.应用SLN-STAT3 decoy ODN转染卵巢癌细胞SKOV3和A2780，采用荧光显微镜及流式细胞术检测FITC标记的SLN-STAT3 decoy ODN在卵巢癌细胞中的细胞摄取情况，Western blot法检测STAT3，p-STAT3蛋白的表达情况。采用商品化的LipofectamineTM2000(Lipo)介导STAT3 decoy ODN的转染作为阳性对照。 2.MTT法检测SLN-STAT3 decoy ODN(0，12.5，25，50nmol/L)转染卵巢癌细胞SKOV3和A2780后不同时间(24h，48h，72h)的细胞存活率。检测转染48h后，不同处理组(NC，SLN，SLN-STAT3 decoy ODN，Lipo-STAT3 decoy ODN，naked STAT3 decoy ODN，SLN-STAT3 scrambled ODN，Lipo)的细胞存活率。 3.AnnexinⅤ-FITC/PI双染色法检测SLN-STAT3 decoy ODN对卵巢癌细胞凋亡的影响;Western blot法检测SLN-STAT3 decoy ODN对卵巢癌细胞凋亡相关蛋白表达的影响。 4.透射电镜下观察SLN-STAT3 decoy ODN转染卵巢癌细胞后细胞内自噬体及自噬溶酶体的形态。吖啶橙染色检测SLN-STAT3 decoy ODN对卵巢癌细胞自噬水平的影响。Western blot法检测SLN-STAT3 decoy ODN对卵巢癌细胞自噬相关蛋白表达的影响。 5.采用细胞划痕实验检测SLN-STAT3 decoy ODN对卵巢癌细胞迁移能力的影响。采用Transwell侵袭小室实验检测SLN-STAT3 decoy ODN对卵巢癌细胞侵袭能力的影响。Western blot法检测SLN-STAT3 decoy ODN对卵巢癌细胞侵袭迁移相关蛋白表达的影响。 结论: 1.SLN-STAT3 decoy ODN能够被卵巢癌细胞SKOV3和A2780高效摄取。 2.SLN-STAT3 decoy ODN能够抑制卵巢癌细胞的生长，诱导卵巢癌细胞发生凋亡和自噬性细胞死亡，抑制卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。 3.SLN-STAT3 decoy ODN有望成为卵巢癌基因治疗的新策略。 第三部分 SLN-STAT3 decoy ODN复合物靶向阻断STAT3对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用及机制研究 目的: 1.建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型，探讨SLN-STAT3 decoy ODN对荷瘤裸鼠的体内抗瘤效应。 2.探讨SLN-STAT3 decoy ODN体内抗瘤效应的机制。 3.探讨SLN-STAT3 decoy ODN在裸鼠体内应用的安全性。 方法: 1.采用皮下注射法将人卵巢癌细胞SKOV3接种到裸鼠右侧肩部皮下，建立裸鼠卵巢癌移植瘤模型。 2.接种后第14天，可触及裸鼠皮下肿瘤结节时，将裸鼠随机分为四组，每组5只，分别给予PBS，SLN-STAT3 scrambled ODN，naked STAT3 decoy ODN和 SLN-STAT3 decoy ODN隔日进行瘤内多点注射，连续处理30天。每4日测量肿瘤体积。 3.治疗结束后，取裸鼠肿瘤组织、心脏、肝脏及肾脏，制作石蜡切片，行HE染色，显微镜下观察。取裸鼠血液，检测SLN-STAT3 decoy ODN对血常规，肝肾功能的影响。 4.TUNEL法检测SLN-STAT3 decoy ODN在裸鼠体内对卵巢癌细胞凋亡的影响。 5.透射电镜下观察裸鼠肿瘤组织的超微结构。 6.Western blot法检测SLN-STAT3 decoy ODN对裸鼠肿瘤组织中凋亡、自噬和侵袭相关蛋白表达的影响。 结论: 1.SLN-STAT3 decoy ODN对人卵巢癌裸鼠移植瘤的生长有抑制作用。 2.SLN-STAT3 decoy ODN可以在裸鼠体内诱导卵巢癌细胞的凋亡和自噬性细胞死亡，抑制肿瘤组织的侵袭转移。 3.SLN-STAT3 decoy ODN在裸鼠体内无明显的骨髓抑制作用和心、肝、肾毒性。