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目的：利用玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）单抗及其抗独特型单抗，建立一步无毒免疫学检测技术；利用噬菌体随机环七肽库淘选出与ZEN单抗1G4不同识别位点的ZEN结合肽，初步验证其用于建立夹心ELISA法的可行性。方法：（1）对本实验室前期研制的ZEN单抗细胞株1G4及其抗独特型单抗细胞株1D5克隆化，筛选出分泌高亲和力抗体的细胞株，并制备其腹水型抗体。包被抗独特型单抗1D5，与辣根过氧化物酶（HRP）标记的ZEN单抗1G4建立一步竞争ELISA方法，实现对ZEN的无毒检测。（2）包被抗独特型抗体1D5，与待测物竞争性结合辣根过氧化物酶标记的单抗1G4，以鲁米诺-辣根过氧化物酶-过氧化氢为检测系统，建立一步竞争化学发光酶免疫分析法（CLEIA），并对反应条件进行初步优化。（3）以ZEN-1G4抗原抗体复合物为靶分子，对噬菌体随机环七肽库进行3轮免疫亲和筛选；分别以ZEN-1G4复合物或1G4为包被物，夹心ELISA筛选出与1G4识别不同位点的ZEN结合肽噬菌体单克隆，并初步验证其用于建立ZEN的夹心ELISA检测法的可行性。结果：（1） ZEN的直接竞争ELISA标准曲线的回归方程为y=-30.195x+61.622,(R2=0.9849)其中y为抑制率，x为竞争物浓度的对数，检测范围（IC80-IC20）为0.25ng/mL-24.12ng/mL，半抑制率IC50为2.426ng/mL，检测限为0.114ng/mL；（2）ZEN的直接竞争化学发光免疫分析法标准曲线的回归方程为y=-40.205x+46.303（R2=0.9799），检测范围（IC20-IC80）0.145ng/mL-4.51ng/mL， IC50为0.8ng/mL，检测限为0.081ng/mL；（3）通过3轮筛选，随机挑取40个噬菌斑进行夹心ELISA鉴定，结果显示有2株噬菌体克隆与1G4-ZEN的结合亲和力略高于与1G4的，但进行ZEN梯度浓度检测未显示有差别。结论：1、利用ZEN单抗及其抗独特型抗体成功建立了ZEN的无毒直接竞争ELISA方法和化学发光酶免疫分析法。2、通过噬菌体肽库筛选技术，未获得只与ZEN或ZEN-1G4复合物结合而不只与1G4结合的噬菌体克隆。