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癌症是当前危害人类健康和生命的主要疾病之一,而结肠癌死亡率已占西方国家癌症死亡率的第2位,在我国占第5位。目前使用化学合成的抗肿瘤药物大多会产生毒副反应,影响疗效及患者的生命质量,因此从中草药中寻找毒性低、疗效高的抗肿瘤活性成分成为当今抗肿瘤药物发展方向。本试验以灵芝为研究对象,提取分离出灵芝多糖,并采用超滤法对其进行分子质量的分级,研究了不同分子质量的多糖组分体外抑制结肠癌肿瘤细胞增殖的活性。结果如下：1用不同体积浓度的乙醇溶液中沉淀分离出灵芝粗多糖,50%级分,66%级分和80%级分多糖,其粗多糖提取得率分别为2.59%、2.31%和3.08%。分别用Sevage法和酶法联合Sevage法脱除灵芝粗多糖中的蛋白质,后者脱除蛋白过程中灵芝多糖损失率小,蛋白脱出率高,为较优的脱蛋白方法。2根据膜通量筛选四种超滤膜的最适操作压力、操作温度和灵芝多糖质量浓度分别为：Biomax500:0.08Mpa,40～45℃,10mg/mL；Biomax300:0.06Mpa,20～30℃,10mg/mL；Ultracel PL-100:0.08Mpa,40～45℃,10mg/mL；Ultracel PL-30:0.06Mpa,40～45℃,10mg/mL.3采用超滤分级法得到五个级分的灵芝多糖：GLPa≧100万;60万≦GLPb≦100万；20万≦GLPc≦60万；6万≦GLPd≦20万和GLPe≦6万共五个级分,其各自的多糖含量：GLPa为92.00%,GLPb为78.84%,GLPc为83.06%,GLPd为75.23%,GLPe为62.88%。6万～20万分子量的多糖所占比例最大,为47.19%；100万以上分子量的多糖所占比例为19.97%；20万～60万分子量的灵芝多糖所占比例为13.90%；6万以下灵芝多糖所占比例为9.50%；而60万～100万分子量的灵芝多糖所占比例为9.44%。4对超滤分级所得五个组分(GLPa-GLPe)的筛选,得出GLPc,即分子量为20-60万组分的灵芝多糖具有显著的抑制人结肠癌细胞HCT-116增殖的作用,当添加GLPc质量浓度为625、1250、2500、5000和10000μg/mL时,抑制率分别为15.22%、34.36%、51.83%、77.43%和99.43%,对细胞的抑制率呈显著的剂量依赖关系,最高剂量时结肠癌细胞HCT-116的增殖率不到1%,有显著的体外抗癌细胞增殖的活性；分级灵芝多糖体外抑制人结肠癌细胞HCT-116增殖抑制作用的研究得出,最佳的作用时间为72h。