楮头红保肝降酶活性成分研究

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楮头红( Sarcopyramis nepalensis Wall.),又名尼泊尔肉穗草、风鼓斗草(风柜斗草),属于野牡丹科(Melastomaceae)中的肉穗草属(Sarcopyramis Wall1)。主要分布于东南亚和我国的四川、云南、湖北、广西、广东、江西、台湾、福建等地。据《中药大词典》记载:楮头红全草可药用,具有清热解毒、清肝泻火之效,是治疗急性肝炎、肺热咳嗽、蛇头疔、无名肿毒、胃肠炎等疾病的珍稀名贵中草药。对急性肝炎(甲肝、乙肝急性期)疗效最佳,对慢性肝炎及乙肝病毒携带者有效,在福建、湖北等民间广为使用,是一种极有价值的天然药用植物和中草药资源。对该植物的化学成分、药理活性、药效关系等的研究目前尚未见系统报道。为了解其含有的主要化学成分及保肝降酶物质基础,本课题组开展了如下实验研究,以期为临床用药提供科学依据。  一、楮头红化学成分研究  本课题以楮头红为研究对象,采用正、反相硅胶柱层析、凝胶等各种分离方法,从其乙醇提取物的石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位中共分离出12个化合物,分别为5,7,3’-三羟基-8-(α-甲基-3’’,4’’,5’’-三羟基苄基)-4’-甲氧基黄酮(1)、(E)-1-(3,4-二羟基苯基)丙烯酸乙酯(2)、硬脂酸(3)、软脂酸(4)、对羟基苯甲酸(5)、3,4-二羟基苯甲酸(6)、龙胆酸(7)、没食子酸(8)、β-谷甾醇(9)、胡萝卜苷(10)、豆甾醇硬脂酸酯(11),其中化合物1为一个结构新颖的具有8-α-甲基苄基的黄酮,很可能是由双黄酮降解得到的人工产物,该化合物目前尚未见文献报道,其他化合物均为首次从该植物中获得,见表Ⅰ。  二、楮头红保肝降酶活性研究  1.楮头红不同极性部位保肝降酶活性筛选  取雄性小鼠80只,随机分成正常对照组,病理模型对照,水飞蓟素组,石油醚部位给药组,乙酸乙酯部位给药组,正丁醇部位给药组,水部位给药组,总膏给药组共8组。正常对照组和模型对照组每天灌胃给予同等体积0.5%吐温-80溶液;水飞蓟素组每天灌胃给予200mg/kg/d水飞蓟素,其余组给药剂量折算为生药材均为10g/kg小鼠体重连续给药10天,第10天给药1小后,正常对照组腹腔注射同等体积大豆油,其他组均腹腔注射0.2%CCl4油溶液。  分析实验结果发现模型组血清ALT、AST高出正常组10到50倍左右,虽然各部位给药组的血清ALT、AST均有所下降,但超出正常水平较多,在临床上并无治疗意义。综合文献值和本实验室条件,原因可能为造模时腹腔注射0.2%CCl4油溶液浓度太高,为了更好地观察药物的保肝作用,宜将CCl4浓度降为0.1%;结果初步显示在同等生药剂量条件下,总膏和正丁醇部位有一定对抗CCl4所致急性肝损伤的作用。但其他各部位也都有一定降酶作用,原因可能为总膏萃取过程中存在严重乳化现象,造成部位内成分重叠,分散了有效成分。因此,下一步实验决定只检测总膏的活性,不再考察各部位降酶活性。  2.楮头红醇提物对四氯化碳所致小鼠肝损伤的保护作用  以腹腔注射0.1%CCl4油溶液造模,考察按生药材剂量为10g/kg、30g/kg两个剂量的总膏对肝损伤小鼠的ATS、ALT、SOD、MDA、GSH等指标的影响。结果显示楮头红醇提物低、高剂量组ALT、AST活性均明显低于模型组,差异有显著性意义(P<0.05,P<0.01);楮头红醇提物低、高剂量明显升高对四氯化碳所致肝损伤小鼠的T-SOD活力和GSH含量,降低MDA的含量,其差异有显著性意义(P<0.05);病理组织学检查显示楮头红醇提物低、高剂量肝细胞肿胀、坏死和炎症细胞浸润程度明显轻于模型组。  3.楮头红醇提物对D-半乳糖胺所致小鼠肝损伤的保护作用  以腹腔注射500mg/kg D-半乳糖胺造模,考察按生药材剂量为10g/kg、30g/kg两个剂量的总膏对肝损伤小鼠的ATS、ALT、SOD、MDA、GSH等指标的影响。楮头红醇提物低、高剂量组ALT、AST活性均明显低于模型组,差异有显著性意义(P<0.05),楮头红醇提物低、高剂量组ALT、AST活性呈现一定的量效关系;楮头红醇提物低、高剂量明显升高对D-半乳糖胺所致肝损伤小鼠的T-SOD活力和GSH含量,降低 MDA的含量;病理组织学检查显示楮头红醇提物低、高剂量肝细胞肿胀、坏死和炎症细胞浸润程度明显轻于模型组。  综上,通过对楮头红较为系统的化学成分研究,发现该药材中含较多的酚酸类成分以及罕见的8-α-甲基苄基的黄酮化合物,为进一步有针对性的分离该植物中中等极性部位物质提供指导信息,减少了系统分离的盲目性;通过CCl4和D-GalN两个化学性肝损伤模型考察楮头红的保肝降酶活性,证实该药材具有一定的抗肝损伤活性,其作用机制可能是多方面的,尤其与抗氧化活性密切相关,具体作用靶点和物质基础还有待更为深入的研究。
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