不同株系丹参遗传差异比较研究

来源 :山东中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rongxiaokun
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研究目的:利用DNA条形码对近缘丹参进行比较研究,以期为近缘丹参的鉴定提供分子依据;对丹参脂溶性成分合成途径上的关键酶基因进行表达量研究,以期找出对脂溶性成分影响较大的基因,进而为调节丹参脂溶性成分的生物合成,解决丹参药源问题做出基础性的贡献。研究方法:对10个株系的丹参从植株形态加以区分的基础上,用UV测定总黄酮总酚酸含量及其抗氧化能力,用HPLC测定其主要脂溶性和水溶性成分的含量。然后从DNA条形码的角度,选取ITS2、matK、rbcL和psbA-trnH四种片段对所研究材料进行序列间的对比研究,用定量PCR进行关键酶基因表达水平的研究。最后对所得数据进行系统性的分析。主要研究结果:(1)通过对10个株系的丹参从植株形态,总黄酮、总酚酸含量以及对其抗氧化活性能力上的比较,发现所研究材料无论从外观上还是在内在化学成分上均有差别,为后续研究奠定材料基础。(2)通过对不同DNA条形码序列的对比研究,发现psbA-trnH和ITS2的拼接序列可用以区分所研究材料,为证明本研究的实验材料存在差异提供了分子依据,同时为近缘丹参的鉴定提供新的方法和思路。(3)通过对丹参酮类成分与其合成途径上的关键酶基因的表达水平之间的相关性研究,发现DXS1、DXS2、GGPPS、HMGR、CPS与丹参酮类成分含量有较高的相关性,相比之下,HDR、KSL与丹参酮类成分含量的相关性则较低。结论:psbA-trnH和ITS2拼接联合使用,为亲缘关系较近的丹参的鉴定提供了新的方法。DXS1、DXS2、GGPPS在丹参酮类成分的积累中具有较重要的作用,其次,HMGR、CPS对丹参酮类成分的积累也有较大影响,而HDR、KSL对丹参酮类成分的积累作用则相对较小,为从分子角度提高丹参脂溶性成分含量提供参考。
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