重组人EPO对rhIL-6诱导人原代肝细胞和HepG2细胞Hepcidin mRNA表达的抑制作用

来源 :中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chris916
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
研究背景:慢性病贫血(ACD),常见于慢性感染、肿瘤及风湿免疫疾病,对患者的生活质量与预后可造成严重影响。ACD发生的机制为肠道铁吸收障碍和网状内皮系统铁扣留,新发现的小分子肽hepcidin被证实在这一过程中起核心作用。Hepcidin是一种急性期蛋白,在肝细胞中合成,通过内化降解小肠上皮基底面和巨噬细胞表面的铁转运受体FN1,干扰了铁从肠道的吸收和从巨噬细胞的释放。IL-6等细胞因子在体内和体外实验促进其合成方面有重要作用,被认为是ACD的关键介导物。实验证实外源性EPO能降低正常小鼠与ACD小鼠肝脏的HepcidinmRNA水平,改善ACD程度。但是EPO是否能改变人肝细胞HepcidinmRNA表达尚未被阐明。 研究目的: 1.通过不同培养条件下人原代肝细胞培养,模拟体内ACD状态,观察Hepcidin表达的变化。 2.探索EPO对原代肝细胞及肝细胞株的Hepcidin表达影响,探讨rhEPO在ACD治疗方面的可能机制。 研究方法: 1.建立新鲜离体人原代肝细胞的培养条件,并进行HepG2人肝肿瘤细胞系细胞的培养。 2.人原代肝细胞与HepG2人肝癌细胞培养液中加入不同浓度的rhIL-6、rhEPO、rhIL-6+rhEPO,作用不同时间。 3.提取mRNA,RT-PCR后进行紫外荧光显像,以Hepcidin与G3PDH的mRNA比值进行半定量分析:比较不同条件下,人原代肝细胞及肝肿瘤细胞HepcidinmRNA的表达情况。 研究结果: 1.重组人IL-6能刺激HepG2细胞HepcidinmRNA表达升高,并随时间变化,24小时达峰值。重组人EPO对IL-6刺激HepcidinmRNA表达有一定的抑制作用。单纯rhEPO作用于HepG2细胞,Hepcidin表达基本无变化。 2.随rhIL-6剂量的增加,HepcidinmRNA表达逐渐上升。rhIL-6的浓度20ng/ml时最高,在此后升高趋势不明显。 3.rhIL-6剂量一定的情况下,给予不同剂量的rhEPO,可以观察到EPO对Hepcidin表达升高的抑制作用。培养液中rhEPO浓度达到0.5-2.0U/ml时,抑制效果最为显著,而EPO浓度进一步升高到4-8U/ml,Hepcidin表达未见进一步抑制。 4.重组人IL-6能使人原代肝细胞HepcidinmRNA表达明显增加,rhEPO对rhIL-6刺激Hepcidin表达有抑制作用。 结论: 1.重组人IL-6能刺激HepG2细胞HepcidinmRNA表达升高,并在一定范围内呈时间、剂量依赖效应,rhEPO对这一作用有抑制作用。 2.重组人IL-6能诱导新鲜离体培养的人原代肝细胞HepcidinmRNA表达明显升高,rhEPO能抑制这一作用。
其他文献
摘 要:小班幼儿刚开学都有不同程度的分离焦虑,毕竟这是孩子第一次离开父母,全新的环境,陌生的面孔,还要独自在幼儿园适应集体生活,所以刚开学的时候,小班的教室里总是充满了哭声,孩子们坐的坐、跑的跑、哭的哭……这种不适应的表现是可以理解的。那么教师在面对新入园孩子时,如何帮助他们快速认识并建立班级常规呢,这是每个教师必备的一项任务。  关键词:幼儿园;小班;常规;教育  一、 认识规则,从小做起  建
通过对两品种育种者种子的贮藏试验,及对以育种者种子为种源基础的“四级程序”原种的产量鉴定,探讨了在相应干贮条件下育种者种子有关性状变化规律,以及“四级程序”原种的应用
摘 要:游戏是幼儿的天性,通过游戏,幼儿可以感受到乐趣,学习到知识,满足自己的好奇心,在潜移默化中发展个性,提升幼儿的动手、动脑能力,促进幼儿大脑发育,总而言之,游戏对幼儿而言十分重要,是幼儿幼时的主要任务,可以为幼儿的童年增添丰富的色彩,促进学生健康成长。基于此,研究游戏对幼儿的影响,游戏的种类等内容,可以达到游戏点亮幼儿快乐童年的目的。  关键词:游戏;幼儿;快乐;童年  一、 前言  幼儿的
摘 要:随着时代的进步,社会的发展,人们对幼儿而教育越来越重视。然而,要提高幼儿教育教学水平,就必须有一支业务素质强、思想素质过硬的教师队伍,这是幼儿教育的根本。幼儿园工会工作是领导和教职工之间的桥梁;是同事之间相互学习、交流、互助的纽带;是幼儿园不可或缺的基础保障。  关键词:幼儿园;工会;纽带;保障  一、 幼儿园工会工作的现状  幼儿园工会工作的现状不容乐观,有许多幼儿园的工会形同虚设,甚至
后季稻塑盘旱育秧的出苗率、成秧率、地上部鲜重和根数都不及肥床旱育秧。但由于塑盘旱育秧抛栽时根系损伤轻,抛后新根发生量和老根恢复情况均明显好于肥床旱育秧,产量也高于肥
摘 要:从已经举行的浙江省四次技术选考试题看,补全三视图属于必考的加试题,而且已经没有立体图,难度大大提高了。并且随着通用技术课程的不断成熟以及为了增加考试的区分度,没有立体图的三视图补线这种题型还会持续,难度有可能还会不断变化。如何才能让学生快速正确地来补全三视图,成为广大复习应考师生的迫切关注话题,笔者总结归纳出来的“转折点观察法”“延伸法”“立体切割法”三种方法可以有效地解决上述问题。  关
目前,随着国家和地方对水产养殖专业卓越人才的需求逐渐增大,“卓越人才培养”已经成为各高校的重要任务之一,并成为高等教育界的热点问题.本文总结了湖南农业大学水产养殖专
摘 要:目的:了解芜湖市中年男子运动项目选择现状,为进一步推进全民健身计划和“健康中国”2020战略计划提供理论依据。方法:采用自编问卷对芜湖市不同职业的人群共562人进行问卷调查和访谈。结果:蕪湖市中年男性对当前的运动满意度相对较高,运动项目偏好轻体育运动,以步行(跑步)为主,项目选择的主要动机是增强体质和娱乐爱好。结论:当前芜湖市中年男性运动项目选择面相对较窄,应依据当前的运动项目进行适当的扩
摘 要:通过比较传统实习与实习教学工作,研究传统实习教学与现代企业发展,对于现代实习教学和企业发展的影响,对于深入认识实习教学科研创新的一般规律,具有重要意义。通过现代师徒制教学体系,利用“融合”理念,解决一系列的问题,最终使电工实习教学改革取得了较好的效果。  关键词:传统实习教学;企业发展;现代师徒制;融合;教学效果  一、 引言  一种普遍的观点认为企业自动化主要涉及企业生产机械设备的改造,
宁麦7号在1990~1992年南方冬麦区长江中下游(北片)小麦良种区域试验中,两年平均亩产分别为34705kg和42683kg,分别比扬麦5号(CK)增产1576%和212%;在1991~1993年江苏省淮南片小麦良种区试中,平均亩产分别为40120kg和35153kg,分别比扬麦5号