论文部分内容阅读
第一部分：NOS基因单核苷酸多态性在预测放射性肺损伤中的价值目的：探讨汉族人群NOS基因中与放射性肺损伤相关的单核苷酸多态性位点,以建立临床实用的放射性肺损伤预测模型。材料与方法：2009年12月至2011年1月,山东省肿瘤医院放疗科收治的301例未行手术治疗的经组织学或细胞学确证的肺癌患者纳入本研究。留取患者治疗前外周血标本,提取外周血全基因组DNA,利用标签SNP和常见的SNP位点相结合的策略在NOS2A和NOS3基因中共选择35个SNPs,通过Sequenom MassArray system进行基因分型分析。根据患者在放疗中及放疗后的症状和影像学表现对放射性肺损伤进行评价并分级(标准为NCI-CTCAE3.0版),主要终点指标为≥2级放射性肺损伤。用SPSS19.0软件进行统计分析,采用Kaplan-Meier累积发生率评估放射性肺损伤的风险,单因素和多因素分析均采用Cox比例风险模型对临床因素、基因型与放射性肺损伤相关性进行评价。结果：纳入本研究的301例患者,其中男性232例,女性69例,中位年龄60岁,中位随访时间16个月,中位放疗剂量为59.6Gy。放疗后81例(26.9%)患者发生了2级及以上的放射性肺损伤(2级、3级、5级发生例数分别为48、28、5例)。与放射性肺损伤发生明显相关的临床及剂量学因素包括性别、放疗剂量、双肺平均剂量、双肺V20。单因素COX回归分析表明：6个单核苷酸多态性位点(NOS3基因rs11771443、rs1799983; NOS2A基因：rs2297518、rs1137933、rs3794763、rs16949)与发生≥2级放射性肺损伤的风险显著相关。多因素分析校正其它因素后,它们的相关性仍有统计学意义(P值分别为0.024,0.028,0.001,0.000092,0.024,0.001)。行Bonferroni校正后发现,三个SNPs (rs2297518、rs1137933、rs16949)仍显著影响了放射性肺损伤的发生(P值分别为0.019、0.001748、0.019)。进一步亚组分析表明它们的相关性独立于放疗剂量和双肺平均剂量。由于3个SNPs (rs2297518,rs1137933, rs16949)之间呈现出强的连锁不平衡(r2=0.57-0.73),我们进行了单体型分析后发现：与频率发生率最高的GCT单体型相比,带有ATC单体型的患者≥2级放射性肺损伤发生风险明显降低(OR=0.157;95%CI,0.047-0.522; P<0.001)。结论：NOS2A和NOS3基因的单核苷酸多态性可能成为肺癌患者放射性肺损伤发生的可靠的预测和决定因子。第二部分：NOS基因单核苷酸多态性与NSCLC放化疗敏感性相关性研究目的：探讨汉族人群NOS基因中与NSCLC放化疗敏感性相关的单核苷酸多态性位点,以指导NSCLC患者的个体化治疗。材料与方法：2009年12月至2011年1月山东省肿瘤医院放疗科收治的198例病理证实的不可手术的Ⅲ-Ⅳ期NSCLC患者,接受了中位60Gy(45-80.6)的放疗和以铂类为基础的两联药物化疗,其中同步放化疗94例(47.5%),序贯放化疗104例(52.5%)。通过Sequenom MassArray system对NOS2A和NOS3基因中的35个SNPs进行基因分型。采用RECIST1.1标准评估患者对治疗的反应,包括完全缓解(CR),部分缓解(PR),疾病稳定(SD)和疾病进展(PD)。其中认为CR+PR为反应者或缓解者,SD+PD为无反应者或未缓解者。评估终点为完成治疗后1-2月。统计软件采用SPSS19.0,单因素分析采用卡方检验,多因素分析采用logistic回归对其它因素进行校正后评价基因型对放化疗敏感性的影响。结果：198例NSCLC患者中,反应者为87例(43.9%),无反应者为111例(56.1%)。放疗剂量≥60Gy与小于60Gy的患者相比,有更高的治疗缓解率(53.8%vs29.6%,P=0.001)。单因素分析结果显示：35个SNPs的每一基因型与治疗反应之间没有相关性(P值,0.125-1.000)。多因素分析对放疗剂量、性别、年龄、病理类型、吸烟和体力状态、分期、肿瘤位置、是否同步放化疗等因素进行校正后发现,它们之间的相关性仍没有显著的统计学意义。结论：NOS2A和NOS3基因的单核苷酸多态性与NSCLC患者的放化疗敏感性之间可能没有相关性。