【摘 要】
:
目的:1.骨碎补干预骨髓间充质干细胞向软骨细胞诱导。2.观测兔软骨细胞-FN/PLGA/TGF-β1生物支架复合体对兔膝关节软骨缺损修复的实验研究。 方法:1.进行兔骨髓间充质干细胞
论文部分内容阅读
目的:1.骨碎补干预骨髓间充质干细胞向软骨细胞诱导。2.观测兔软骨细胞-FN/PLGA/TGF-β1生物支架复合体对兔膝关节软骨缺损修复的实验研究。 方法:1.进行兔骨髓间充质干细胞的体外培养,通过形态学观察、FCM检测及甲苯胺蓝染色进行鉴定;2.最佳浓度骨碎补干预兔 BMSCs向软骨细胞转化,通过 MTT法对细胞活性的检测、免疫组化对Ⅱ型胶原的测定及甲苯胺蓝染色检测GAG的合成等方法观察体外培养的兔BMSCs增殖分化的情况,并以此得到软骨细胞;3.将聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)生物支架切成4mm*4mm*4mm大小,消毒,将诱导好的第2代软骨细胞以4×1010/L体外接种于PLGA生物支架上,体外培养7天,观察细胞在支架内的生长情况、形态及吸附、分布情况;行HE染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色,观察软骨细胞数量、形态及Ⅱ型胶原含量,并利用图像分析软件对Ⅱ型胶原免疫组化染色面积进行分析;4.将细胞-支架复合物植入兔膝关节软骨缺损处,分别在4周,8周,12周取样,观察细胞-支架复合物对软骨缺损的修复情况。 结果:1.①兔BMSCs成均匀分布的簇状生长、形态梭形。在传代培养中形态特性无明显变化、均质性提高,高表达CD44,不表达CD34,可证明为非造血干细胞。②骨碎补可以诱导兔BMSCs向软骨细胞分化,诱导后的细胞能分泌细胞外基质,例如Ⅱ型胶原蛋白,用组织学检查及Ⅱ型胶原抗体免疫荧光检测证实骨髓间充质干细胞已转化为软骨细胞。2.①HE染色对照组支架纤维组织有所增加,未见成软骨细胞和软骨组织,支架被少许骨基质及纤维组织填充;试验组支架降解成网状并被吸收,成软骨区圆形、椭圆形、多边形成软骨细胞及细胞间质逐渐增多,生成少量软骨组织,并见少量多核的破骨细胞及软骨基质;空白组仅见少量淋巴细胞和纤维细胞,未见软骨细胞。②Ⅱ型胶原染色细胞支架组软骨区域PLGA生物支架逐渐降解减少,Ⅱ型胶原染色阳性逐渐增强,类软骨样组织逐渐增多,术后12周后可见少许类软骨样组织;对照组和空白组术后Ⅱ型胶原染色均为阴性。③甲苯胺蓝染色细胞支架组术后4至8周甲苯胺蓝染色阳性逐渐增强,细胞核外类软骨样组织逐渐增多,术后12周有类软骨样组织生成;对照组和空白组各检测周期甲苯胺蓝染色阴性。3.电镜扫描细胞支架组成软骨区可见大量圆形、椭圆形软骨细胞;对照组扫描电镜下表面较粗糙,孔隙较多,大小不一,孔隙间多有交通,未发现软骨细胞;空白组电镜下未发现软骨细胞生成。 结论:1.通过体外对兔BMSCs的分离培养与鉴定,可建立较完善的BMSCs培养体系;骨碎补各组与阳性对照组相比诱导作用弱,但与空白组比较有阳性意义。2.纤维粘连蛋白修饰的PLGA支架具有良好的亲水性,更适合软骨细胞贴附生长以及Ⅱ型胶原的合成。3.软骨细胞-FN/PLGA/TGF-β1复合体修复软骨缺损具有可行性,在软骨组织缺损修复中具有较大的应用前景。
其他文献
摘 要: 计算机基础教学担负着普及计算机基础知识的重要责任,在信息化高速发展的今天,计算机基础教学的地位越来越重要,其教学效果关系到学生的基本素质。对计算机基础教学进行探索与创新,不断创新教学理念与教学方法,培养具有独立思考、适应实践、能够解决实际问题能力的学生,已成为计算机基础教师义不容辞的责任。本文根据计算机基础教学存在的问题,从理论和实践上对教学创新的方法途径进行了探讨。 关键词: 计算机
摘 要: 本文结合数控教学实践,叙述了数控实训教学中存在的问题,探讨了数控实训中的管理方法。 关键词: 数控技术 实训 管理 一、引言 近年来,数控技术得到广泛应用,数控化成为制造业的发展方向。各高校为适应社会的需求在加强和完善“数控技术”课程理论教学的同时,更加突出“数控技术”实训教学环节,并不断对数控实训教学的管理方法提出新的要求。 数控实训教学一般采用分组制及“一人,一棒料,一项
常听学生说:"上政治课最轻松,如同听评书。""上政治课可以梦游周公,但也不影响听课效率。""不要动脑筋,不要记大量的笔记……"我觉得学生在政治课堂并没有得到真正的幸福,仅仅是一种
摘 要: 随着科学技术的飞速发展,计算机仿真技术在各行各业中的应用越来越广泛。同样,计算机仿真技术在职业教育中也越来越得到人们的认可与重视,这是因为计算机仿真技术软件越来越完善、越来越成熟,应用计算机仿真技术可以起到事半功倍的效果,可以节约大量的人力、物力和财力,把人们从繁杂的工作中解脱出来。而且计算机仿真技术在教学过程中直观、高效、乐于为人们所接受,因此大力推广和应用计算机仿真技术已非常重要。
摘 要: 在新课程改革的大潮驱动下,社会各界对学校、对教师提出了更高的要求,如何构建高效课堂是每一位老师都要面临的问题。在教学过程中,不仅要使学生主动获取知识与技能,而且要使学生有过程与方法的经历和体验,最终才可能培养学习兴趣、掌握技能、提高成绩。高效的课堂教学是培养学生获取知识、提高学生学习能力、实现知识与能力互相转化的主要手段。构建优质、高效的课堂教学模式是全体教师面临的共同课题。只有不断思考
摘 要: 新课改后,初中思想品德在教学的思想和方法上都有很大的改观,在内容的编排上更加贴近学生的生活实际,体现了“在生活中体验,在体验中感悟,在感悟中成长”的教育新理念。这就对思想品德老师提出了更高的要求,不仅仅要注重理论方面的教学,更要把书本的理论知识和实际生活联系起来,营造轻松活跃的课堂气氛,帮助学生在课堂中感受现实生活,在生活中回味课堂学习到的知识,让课堂变得更生活化、实际化,从而实现教学的
摘 要: 教师在历史课堂教学中,要以学生为学习主体,以人为本,根据高中历史教材特点激发学生的学习兴趣;相信学生的能力,给学生自主学习和探究性学习的空间和时间;平等对待每一个学生,让学生在合作学习中增长知识与才干。 关键词: 高中历史教学 兴趣 自主学习 合作学习 探究性学习 人民教育出版社的高中历史教学内容包括古今中外历史领域的重要内容,因此教师要以新课程理念指导历史课堂教学,有效提高课堂
随着基础教育课程改革的不断深入,教学的有效性问题日益引起了人们的重视,新课程改革对历史教师提出了前所未有的新要求和挑战,如何以高质量教学迎接挑战,是每一位教师面临的共同问题。如何在教学中实施有效教学,如何提高教学的效益,等等,这些已成为历史教学的热点问题。 所谓有效教学就是指,由于教师在整个教学关系中处于主导地位,因此其教学行为对学生的学习给予了积极且有正面的影响,为了达成教学目标,帮助学生在规
摘 要: 生成,是伴随着当今基础教育改革尤其是新课程改革逐渐被大家频繁使用的一个术语,它正在以这样或那样的方式冲击着原有的课程或课堂形态,构建着新的教学文化形式。因此,如何在物理课堂教学中有效地把握生成,实现高效物理课堂成为我们迫切需要思考、探索和解决的问题。作者围绕高效物理课堂教学从生成的视角总结出一些原则和体会,以抛砖引玉。 关键词: 高效物理课堂 生成 原则 1.生成的含义 《辞海
导言,一方面对上一单元的知识进行高度概括和系统总结,另一方面对本单元的基础知识、重点、难点进行提纲挈领的提示,目的在于使知识点前后衔接起来,过渡自然,使其形成一个整体。导言为实施本单元的探究活动作了开场白,从而导入新课。 导言设计是教学成功的关键之一。好的导言应当集知识性、趣味性、逻辑性于一体,仅用寥寥数语就引起学生的注意,这样才能激发其求知欲,促进其智力开发,活跃课堂气氛。 1.激发学生的兴