1-萘硼酸柱后衍生高效液相色谱荧光法测定单糖的研究

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本文研究了1-萘硼酸的荧光性质,考察了各种实验条件对荧光光谱和荧光强度的影响。研究了在不同条件下1-萘硼酸与几种单糖的反应。建立了1-萘硼酸高效液相色谱-荧光检测器(HPLC-FL)柱后衍生同时对D-葡萄糖、D-果糖、阿拉伯糖和山梨醇进行测定的方法。本论文研究工作主要包括三部分:1.研究了1-萘硼酸的荧光性质,考察了离子强度、溶剂、表面活性剂对其荧光光谱性质的影响及荧光强度与溶液浓度之间的线性关系,测定了它的荧光量子产率。2.研究了1-萘硼酸与D-果糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-甘露糖和山梨醇在不同条件下反应后荧光性质的变化情况。发现在碱性条件下(pH=11),1-萘硼酸与几种单糖反应后荧光强度增强,增强的顺序依次为:山梨醇>D-果糖>D-半乳糖>D-甘露糖>D-葡萄糖,并研究了引起不同程度荧光增强的原因。3.建立了1-萘硼酸高效液相色谱-荧光检测器(HPLC-FL)柱后衍生同时对D-葡萄糖、D-果糖、阿拉伯糖和山梨醇进行测定的方法。优化了色谱条件和衍生条件,结果表明,在该条件下四种糖的组分都能够得到很好的分离,线性良好,测定的饮料和蜂蜜样品的回收率分别在88%-96%和78%-103%之间,相对标准偏差(RSD)均小于3%(n=6)。该方法灵敏度高、准确,适合于单糖的检测及含量测定。
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