碱性磷酸酶属磷酸单酯水解酶,是一组特异的磷酸酯酶,血清中的碱性磷酸酶有四种结构基因型:肝-骨-肾型、肠型、胎盘型以及生殖细胞变异型。它分布于成骨细胞、肝细胞、粒细胞、肾脏、脾脏、胎盘、前列腺和小肠中。其中肝-骨-肾型尤为重要。碱性磷酸酶升高可见于各种形式的胆汁郁积,特别是阻塞性黄疸。骨骼系统的疾病,例如佩吉特病、甲状旁腺功能亢进症、佝偻病、骨软化症以及骨折和恶性肿瘤也可导致碱性磷酸酶的升高。碱性磷酸酶的明显升高也可见于儿童和青少年。原因是骨骼生长迅速,成骨细胞的活性明显增加。这种测定法首先由King和Armstrong提出,由Ohmori,Bessey,Lowry和Brock改良,随后又经Hausamen等改进。1983年,国际临床化学联合会（IFCC）推荐一种测定碱性磷酸酶的标准化法,它通过优化底物浓度和使用添加镁和锌离子的2-氨基-2-甲基-1-丙醇缓冲液测定碱性磷酸酶。本测定法以该推荐法为基础,不过已对它的性能和稳定性进行优化。已按照上述IFCC参考法对本方法进行标准化。磷酸对硝基苯酯+水?A??LP?磷酸+对硝基苯酚检测原理:与标准化法相一致的比色法。在镁和锌离子存在时,磷酸对硝基苯酯经磷酸酶酶解为磷酸和对硝基苯酚。释放的对硝基苯酚与碱性磷酸酶的催化活性呈正比。可通过测定增加的吸光度进行检测,本课题组将利用其检测原理条件下,对试剂盒进行人工干预,在不同温度下对试剂盒进行低温和高温处理,以研究试剂盒在接受不同温度、不同时常条件下对其本身性能的影响,将为寻找对抗不确定运输温度条件的最大耐受程度将提供可靠的数据支持。此次模拟运输温度异常研究是在不同温度,不同时常下对试剂盒的耐受性进行全方位的挑战测试,该试剂盒经过模拟温度后,然后进行上机测试其性能,使用仪器为罗氏公司提供的cobas 8000系列c701,通过性能数据指标来判断该试剂盒实际耐受情况。为此,我们会得到该试剂盒全方位的指标参数,从而为该品牌型号的试剂盒在市场上的实际使用提供强有力的数据支持。本文研究的内容分为以下四个部分:第一部分,碱性磷酸酶试剂盒组分成分的解读,比较全面的归纳总结了碱性磷酸酶试剂盒在工厂的配制、生产、包装、质量控制、放行、跟进稳定性的质量研究。并对碱性磷酸酶试剂盒性能稳定性进行全方位的分析,以寻找对抗不确定运输温度条件的最大耐受程度将提供可靠的数据进行研究。第二部分,温度异常实验研究设计,经温度异常考察后的样品,为了证明其性能稳定性,分别对各个温度各个时常下的试剂盒进行参数性能验证,性能参数选取参考YY/T相关性能指标的规定进行研究,考察是否还能满足性能指标要求。实验数据结果分析汇总。分别以温度轴和性能轴进行数据分析,通过实验数据的接受标准,得到该试剂盒在该温度下的最大耐受时间。通过实验数据,得到该试剂盒在特定的接受标准下的温度时间耐受程度。第三部分反应物的进一步研究,试剂盒盖子经高温后,试剂腔体漏气,盒内溶液产生了挥发,导致反应体系溶液结构发生了变化。影响碱性磷酸酶的反应主要是环境p H和主反应物质磷酸对硝基苯酯含量。第四部分进一步分析磷酸对硝基苯酯的含量测定试验,温度异常研究另外一个可能的影响因素,怀疑是主反应物质4-硝基苯磷酸盐在经理温度异常研究后,反应物质发生化学变化,有可能含量发生改变,导致化学反应没法正常或者减少进行,本次研究采用45°C 48h后失败的试剂盒作为样品,测试试剂盒反应体系中4-硝基苯磷酸盐的含量。如果含量不在一定的范围内,意味着反应体系的4-硝基苯磷酸盐经温度破坏后会引起化学变化导致含量变化。