【摘 要】
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冬瓜（Benincasa hispida cogn.）为葫芦科冬瓜属一年生草本植物,起源于我国南部及印度,含有蛋白质、碳水化合物、维生素以及矿质元素等营养成分,兼具药用和保健功效,属典型的高钾低钠型蔬菜。由于其耐储运、货架期长,在调节蔬菜淡季、保证周年供应中发挥着重要的作用。果重是果菜类蔬菜产量的重要构成性状,在果实发育研究中常被用来衡量果实的大小,长期以来一直都是育种家关注的热点。冬瓜果重是由多
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冬瓜（Benincasa hispida cogn.）为葫芦科冬瓜属一年生草本植物,起源于我国南部及印度,含有蛋白质、碳水化合物、维生素以及矿质元素等营养成分,兼具药用和保健功效,属典型的高钾低钠型蔬菜。由于其耐储运、货架期长,在调节蔬菜淡季、保证周年供应中发挥着重要的作用。果重是果菜类蔬菜产量的重要构成性状,在果实发育研究中常被用来衡量果实的大小,长期以来一直都是育种家关注的热点。冬瓜果重是由多基因控制的数量性状,遗传基础较为复杂,在选择过程中易受环境影响。因此,在冬瓜品种选育过程中,果重的改良是一个难点。在前期研究中,获得了1个冬瓜单果重主效QTL位点,其LOD为5.37,对遗传变异贡献率为15.8%。本研究以小果型冬瓜材料B214为母本,大果型冬瓜材料B227为父本,构建了RILs群体（包含了135个株系）。在全基因组De Novo测序及重测序的基础上,利用初定位区段内及两侧的全基因组In Del分子标记,构建一张包含果重主效QTL位点的局部连锁图谱,结合RILs群体性状的田间调查结果,对冬瓜果重主效QTL进行定位分析,比较亲本间在定位区间内的序列差异,根据冬瓜基因组注释信息筛选候选基因,并利用实时荧光定量PCR技术分析候选基因在大、小果型冬瓜的不同组织和果实不同发育时期的分布及表达特征。具体结果如下:1.冬瓜果重主效QTL定位以母本B214和父本B227为研究材料构建RILs作图群体（135个株系）,根据亲本的基因组序列信息,开发覆盖初定位区间的In Del标记80对,利用双亲进行多态性筛选,共筛选出49对多态性标记,多态率达61.25%。随后,利用这49对多态性标记对RILs群体进行扩增并且用8%聚丙烯酰胺凝胶进行电泳检测,统计基因型数据,用Join Map4.0构建遗传连锁图谱,对分子标记基因型数据和冬瓜果重表型数据进行关联分析,将QTL区间缩小至3.3 cM。2.候选基因的预测比较两亲本间在定位区间内的序列差异,根据冬瓜基因组注释信息,优先考虑果实发育、细胞分裂相关候选基因,通过生物信息学分析,发现Cyclin-like基因可能是与果重相关的候选基因。提取亲本不同组织和果实不同发育时期的RNA,对该基因进行qRT-PCR检测,分析基因表达水平的差异,结果表明Cyclin-like基因在不同果型的两亲本间表达量存在差异,在相同组织和相同发育阶段的果实中,该基因在大果型亲本B227中的表达量均高于小果型亲本B214;在同一亲本的不同组织中,果实中的表达量最高;该基因在授粉后1d（天）果实中表达量最高,随着果实的成熟表达量明显下降,表明该基因在果实发育初期影响冬瓜果重。
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