蛹虫草对运动疲劳大鼠Th1/Th2免疫平衡影响的研究

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研究目的:本研究主要对通过不同干预的大鼠运动疲劳后脾脏组织IFN-γ、IL-4mRNA及其蛋白水平表达变化的研究,分析大鼠在运动疲劳恢复期不同时相IFN-γ/IL-4动态平衡变化特征,进一步了解运动性免疫抑制发生的机制,探究蛹虫草对延缓运动疲劳发生以及维持机体运动疲劳后免疫平衡的机制,并为运动员提供实际、有效、可行的维持机体免疫平衡的理论依据。研究方法:7周龄雌性健康SD大鼠48只,随机分为空白对照组(S组,N=16)、运动对照组(E组,N=16)、蛹虫草+运动组(C+E组,N=16)。第9周最后一次运动至力竭后,S组、E组、(C+E)组分别又随机分为S1组、E1组、(C+E)1组(运动后恢复36h取材,各组N=8)和S2组、E2组、(C+E)2组(运动后恢复一周取材,各组N=8)。S组自然笼养,无任何实验干预,(C+E)组和E组进行9周跑台训练,并在跑台训练后,分别灌胃2ml蛹虫草水溶制剂(400mg/kg)和与(C+E)组相同剂量的0.9%生理盐水。以上各组分别在大鼠训练第1周、第3周运动后36h内眼眶后静脉丛取血,测血清WBC、RBC、Hb、CK、BUN、T等指标。第9周运动后36h,S1组、E1组和(C+E)1组大鼠腹腔注射1%的戊巴比妥(1ml/100g体重)麻醉后,腹主静脉取血,待测同上指标,取大鼠脾脏和血清,采用实时荧光定量PCR技术及ELISA方法检测IFN-γ、IL-4mRNA及其蛋白表达。S2组、E2组和(C+E)2组在运动后一周做同上述取样及检测。S1组、S2组、E1组、E2组、(C+E)1组、(C+E)2组之间采用单因素方差(One-WayANOVA)分析,P<0.05表示具有显著性差异,p<0.01表示具有非常显著性差异。研究结果:(1)大鼠九周运动后36h血液生化指标的变化:Hb和血睾酮,E1组和(C+E)1组明显下降(p<0.05),但(C+E)1组明显高于E1组(p<0.01);血清CK:E1组和(C+E)1组明显升高(p<0.01),但(C+E)1组明显低于E1组(p<0.01);血清BUN:E1组和(C+E)1组明显升高(p<0.01)。(2)大鼠九周运动后36h血液免疫性指标WBC变化:E1组和(C+E)1组均明显下降(p<0.01);但(C+E)1组明显高于E1组(p<0.05)。(3)第九周力竭运动后36h,E1组IL-4和IFN-γmRNA表达明显下降(p<0.01),且IL-4/IFN-γmRNA比值明显上升(p<0.05),IL-4蛋白水平表达略有下降,IFN-γ蛋白水平有所提高,但较S1组均无明显差异。(C+E)1组IL-4和IFN-γmRNA表达明显下降(p<0.01),但IL-4/IFN-γmRNA与S1组无明显差异,IL-4和IFN-γ蛋白水平表达下降(p<0.05)。第九周力竭运动恢复一周后,E2组大鼠IL-4和IFN-γmRNA水平均恢复接近S2组,E2组和(C+E)2组IFN-γ蛋白表达均明显上升(p<0.05)。研究结论:(1)九周递增运动负荷跑台训练后,大鼠处于运动疲劳状态,蛹虫草水溶制剂可以明显减缓运动疲劳发生,并促进运动疲劳恢复。(2)九周递增运动负荷跑台训练后,大鼠机体免疫明显抑制,WBC数量降低,Th1/Th2免疫失衡;但蛹虫草水溶制剂可以改善运动负荷对机体免疫机能的抑制作用,维持机体Th1/Th2处于动态平衡状态。(3)九周递增运动负荷跑台训练在运动恢复一周后,机体免疫恢复Th1/Th2平衡,运动性免疫抑制是暂时的,可逆的。
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