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目的:阵发性睡眠性血红蛋白尿症(Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)患者并发血栓是其常见死因之一,但血栓形成的确切机制尚不明确,目前多认为与血管内溶血、一氧化氮消耗和纤溶系统功能障碍等因素有关。本文通过检测PNH患者血小板膜补体复合物(C5b-9)、血小板膜糖蛋白(CD61)、血小板活化分子(CD62p)的表达及血清可溶性C5b-9(s C5b-9)水平、乳酸脱氢酶水平、D-二聚体、纤维蛋白原、血清补体成分C3、C4水平以及二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(ARA)诱导血小板聚集能力以探究PNH补体消耗、沉积和血小板活化的病理机制。方法:用酶联免疫吸附法(ELISA)检测25例PNH/PNH-AA患者血清s C5b-9,并以30名健康志愿者作为正常对照;采用流式细胞仪检测PNH/PNH-AA患者与正常人血小板PNH克隆(CD59~-PLT)百分数、血小板膜上C5b-9、CD61以及血小板活化标志分子CD62p表达率;收集患者和正常对照组血小板聚集实验(包括ADP诱导和ARA诱导血小板聚集实验),平均血小板体积(MPV)、乳酸乳酸脱氢酶、补体C3、C4、D-二聚体和纤维蛋白原等临床指标结果;分析上述指标的相关性。结果:1.PNH/PNH-AA组患者血小板PNH克隆数(50.58%)显著高于正常对照组(23.57%)(p<0.01);PNH/PNH-AA患者血清D-二聚体水平(485ng/d L)显著高于正常对照组(311ng/d L)(p<0.05);PNH/PNH-AA患者血小板平均体积(MPV)[(10.82±1.30)f L]与正常对照组[(9.43±0.81)f L]相比显著增大(p<0.01);PNH/PNH-AA组LDH≥1000U/L的患者补体C3水平[(86.84±24.23)mg/d L]显著低于LDH<1000U/L患者[(106.52±30.95)mg/d L];PNH/PNH-AA组患者血清s C5b-9水平(390.27ng/m L)显著低于正常对照组(540.39ng/m L)(p<0.01);PNH/PNH-AA组患者PNH克隆血小板(CD59~-PLT)膜C5b-9沉积率[(17.53±6.27)%]与患者正常血小板(CD59~+PLT)[(11.33±5.03)%]及正常对照组血小板[(10.88±3.58)%]相比均显著增高(p<0.01);2.PNH/PNH-AA患者正常血小板(CD59~+PLT)CD61表达率(76.87%)显著低于PNH克隆血小板(94.56%)和正常对照组血小板的表达率(98.41%)(p<0.05);PNH/PNH-AA组患者PNH克隆血小板(CD59~-PLT)膜CD62p表达率(40.07%)和患者正常血小板(CD59~+PLT)(39.99%)与正常对照组血小板(64.21%)相比均显著降低(p<0.01);PNH/PNH-AA患者二磷酸腺苷(ADP)和花生四烯酸(ARA)诱导血小板聚集率[(37.54±24.25)%,24.60%]显著低于正常对照组[(59.20±23.30)%,14.54%](p<0.05).3.D-二聚体,纤维蛋白原水平,网织红细胞百分数及粒系PNH克隆数,补体C3,补体C4,乳酸脱氢酶,血清C5b-9及血小板C5b-9与血小板CD61和CD62p表达均无显著相关性。结论:本研究中PNH/PNH-AA患者血栓发生率低(3/25)显著低于国外数据,但患者确实存在二聚体增高,平均血小板增高和补体消耗等一系列促凝因素,提示有高度的易栓倾向;PNH/PNH-AA患者血小板锚链蛋白(CD59)缺失等因素可能使补体系统激活,最终形成补体复合物C5b-9沉积于异常血小板膜,这种持续而反复的刺激,导致血小板反应能力大大降低,即血小板活化分子CD62p表达下降及血小板聚集力下降,说明血小板在PNH血栓形成过程中非始动因素,且并未起到促血栓作用。