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外切-p-葡聚糖酶(C1)是纤维素酶的重要组分之一,提高该组分的活力是增强纤维素酶协同降解性能、降低纤维素水解成本的关键技术之一。本文采用微晶纤维素琼脂平板法和滤纸崩解法分别对200个里氏木霉重组转化子进行筛选,得到了六个优良转化子,其滤纸崩解速率和在微晶纤维素琼脂平板上的生长速率都较大。进一步在摇瓶条件下进行复筛试验,获得了外切-p-葡聚糖酶高产转化子T. reesei ZU-101,液体培养48h,其C1酶活力可达18.24U·mL-1,是出发菌株的2.16倍;其纤维素酶的总活力(滤纸酶活力FPA)也提高了61.9%。对T. reesei ZU-101的产酶性能进行了深入研究,与出发菌株相比,重组转化子的纤维素酶体系中,内切-β-葡聚糖酶(CMC)和纤维二糖酶的活力变化不大,但外切-β-葡聚糖酶活力明显提高。摇瓶培养120h,C1酶活力可高达34.66U·mL-1,是出发菌株的1.26倍。由于外切-β-葡聚糖酶得到了定向增强,滤纸酶活力也得到了明显提高,发酵120h达7.35IU·mL-1,比出发菌株提高了40%。对重组转化子T.reesei ZU-101的分批补料发酵工艺进行了研究,结果表明:发酵48h后开始补加料液,其乳糖浓度为15%,C/N为7,每隔48h补加2%(V/V),发酵168h C1酶活力可达55.689U·mL-1,是分批发酵工艺(batch process)的2.11倍。以NaOH(2%)预处理后的玉米秸秆为底物,对T.reesei ZU-101所产纤维素酶的降解性能进行了深入研究,在底物浓度为10%、每克底物的纤维素酶用量为20FPIU(滤纸酶活力国际单位)的条件下,T.reesei ZU-101纤维素酶的酶解得率比出发菌株提高了43%;在T.resei ZU-101纤维素酶系中,C1酶活力与CMC活力和滤纸酶活力的比例分别为1:23和4:1,而出发菌株纤维素酶系中,C1酶活力与CMC活力和滤纸酶活力的比例分别为1:24和3:1,纤维素酶复合体系中C1酶活力比例的提高,有利于结晶性较高的秸秆纤维素的协同降解。进一步研究发现:1)增大反应体系中纤维二糖酶活力的比例,可以显著提高酶解得率。在上述相同酶解条件下,当纤维二糖酶用量为300IU·g-1底物,纤维二糖酶活力(IU)与滤纸酶活力(IU)的比例为15:1时,酶解得率可高达95%;2)添加木聚糖酶可以促进秸秆原料的酶解效率,在底物浓度为10%、每克底物的纤维素酶(FPA)、纤维二糖酶用量分别为20IU和100IU,添加木聚糖酶(300IU·g-1底物)可以使玉米秸秆的酶解得率达到94.4%。本文的研究成果在可再生纤维素资源的生物转化与利用方面具有广阔的应用前景。