重组里氏木霉产高活力外切-β-葡聚糖酶的研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:abaccj
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
外切-p-葡聚糖酶(C1)是纤维素酶的重要组分之一,提高该组分的活力是增强纤维素酶协同降解性能、降低纤维素水解成本的关键技术之一。本文采用微晶纤维素琼脂平板法和滤纸崩解法分别对200个里氏木霉重组转化子进行筛选,得到了六个优良转化子,其滤纸崩解速率和在微晶纤维素琼脂平板上的生长速率都较大。进一步在摇瓶条件下进行复筛试验,获得了外切-p-葡聚糖酶高产转化子T. reesei ZU-101,液体培养48h,其C1酶活力可达18.24U·mL-1,是出发菌株的2.16倍;其纤维素酶的总活力(滤纸酶活力FPA)也提高了61.9%。对T. reesei ZU-101的产酶性能进行了深入研究,与出发菌株相比,重组转化子的纤维素酶体系中,内切-β-葡聚糖酶(CMC)和纤维二糖酶的活力变化不大,但外切-β-葡聚糖酶活力明显提高。摇瓶培养120h,C1酶活力可高达34.66U·mL-1,是出发菌株的1.26倍。由于外切-β-葡聚糖酶得到了定向增强,滤纸酶活力也得到了明显提高,发酵120h达7.35IU·mL-1,比出发菌株提高了40%。对重组转化子T.reesei ZU-101的分批补料发酵工艺进行了研究,结果表明:发酵48h后开始补加料液,其乳糖浓度为15%,C/N为7,每隔48h补加2%(V/V),发酵168h C1酶活力可达55.689U·mL-1,是分批发酵工艺(batch process)的2.11倍。以NaOH(2%)预处理后的玉米秸秆为底物,对T.reesei ZU-101所产纤维素酶的降解性能进行了深入研究,在底物浓度为10%、每克底物的纤维素酶用量为20FPIU(滤纸酶活力国际单位)的条件下,T.reesei ZU-101纤维素酶的酶解得率比出发菌株提高了43%;在T.resei ZU-101纤维素酶系中,C1酶活力与CMC活力和滤纸酶活力的比例分别为1:23和4:1,而出发菌株纤维素酶系中,C1酶活力与CMC活力和滤纸酶活力的比例分别为1:24和3:1,纤维素酶复合体系中C1酶活力比例的提高,有利于结晶性较高的秸秆纤维素的协同降解。进一步研究发现:1)增大反应体系中纤维二糖酶活力的比例,可以显著提高酶解得率。在上述相同酶解条件下,当纤维二糖酶用量为300IU·g-1底物,纤维二糖酶活力(IU)与滤纸酶活力(IU)的比例为15:1时,酶解得率可高达95%;2)添加木聚糖酶可以促进秸秆原料的酶解效率,在底物浓度为10%、每克底物的纤维素酶(FPA)、纤维二糖酶用量分别为20IU和100IU,添加木聚糖酶(300IU·g-1底物)可以使玉米秸秆的酶解得率达到94.4%。本文的研究成果在可再生纤维素资源的生物转化与利用方面具有广阔的应用前景。
其他文献
目的综合脑胶质母细胞瘤(GBM)术前非影像学危险因素评估预后。方法回顾性分析159例脑GBM病人术前非影像学因素对总生存期(OS)的影响,对性别、发病年龄、术前KPS评分、血小板与淋
血友病是临床上最常见的遗传性出血性疾病,其中血友病A为因子Ⅷ缺乏,血友病B为因子Ⅸ缺乏,患者往往有严重的出血倾向.在无有效治疗的时期,患者多因出血致残,并在成年以前死亡
近代以来,中国就面临着从传统社会向现代社会转变的历史任务。在内外交困的环境中,中国效法求师的思想资源却处于混乱衰败乃至“恶化”的状态。现代政治的要素包括完善的宪政
“文化意识”是新英语课程标准的的新理念,旨在让学生接触和了解英语国家文化。教师要在实施教学的同时渗透文化意识,增加学生对异国文化的认识。
通过试验得出容积效率随曲轴转速和压力增高而下降的规律,并分析了产生这种变化规律的机理,可供设计参考。
随着信息技术的发展,特别是Web的不断普及和应用,Web上的信息飞速增长,形成了巨大的信息资源.因此,如何从巨量的信息中快速有效地提取出所需的信息,成为迫切需要解决的问题.
《爱丽丝梦游仙境》采用了多种拍摄和制作技术,并且这些技术与技巧结合得非常好,给观众带来了一场非常完美的视听盛宴。本文主要介绍该片制作方案的确定、摄影器材的选择、为合
明四夷馆是中国最早培养翻译人员的专门机构,四夷馆设立于明永乐年间,初设时有八馆,没有专设日本馆,其从属于何馆,史料记载不一。在明四夷馆的翻译教材会同馆本《华夷译语》中,出现
目的揭示川芎当归提取物(ELCAS)抑制血管平滑肌细胞增生的分子机制。方法以体外培养的原代大鼠血管平滑肌细胞为研究对象,应用Western blot方法检测不同质量浓度ELCAS对血管平滑
微生物肥料又称生物肥料、菌肥、接种剂,是一类以微生物生命活动及其产物促进农作物得到特定肥料效应的微生物活体制品。它克服了化肥的缺陷,弥补了化肥的不足,对修复土壤、维持