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目的：通过小分子干扰RNA(siRNA)技术，建立大鼠关节软骨细胞中酸敏感离子通道1a(ASIC1a)表达沉默模型，观察ASIC1a mRNA及其蛋白的相对表达量的变化，检测ASIC1a通道不同表达水平的Ca2+内流变化以及对酸化诱导细胞凋亡的影响，并通过监测凋亡相关基因Bax、Bcl-2mRNA的相对表达水平，研究酸敏感离子通道1a的表达沉默对AA大鼠关节软骨细胞凋亡可能的作用机制。方法：通过化学合成法合成特异性荧光短链ASIC1a siRNA-FAM，使用Lipofectamine2000转染试剂盒将ASIC1a siRNA转染入关节软骨细胞，采用荧光显微镜、流式细胞术、实时荧光定量PCR(q-RT-PCR)及Western Blot法检测siRNA转染效率及其对ASIC1a mRNA和蛋白表达的抑制作用。同时采用胞外酸化的方法建立AA大鼠关节软骨细胞凋亡体外模型，激光共聚焦技术检测[Ca2+]i水平，Annexin-V/PI流式细胞术、Hoechst33258染色法、Tunel法检测各组细胞凋亡情况，免疫细胞化学技术检测软骨细胞分泌的Ⅱ型胶原含量变化，q-RT-PCR检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2的mRNA的相对表达水平。结果：1.实验设计的3个ASIC1a-siRNA均能成功转染入大鼠关节软骨细胞，且转染siRNA-3后大鼠关节软骨细胞中ASIC1a mRNA表达显著低于正常组，最大抑制率为84.8%；Western Blot结果显示，转染特异性siRNA-3后ASIC1a蛋白表达明显低于正常组；2.将抑制效率最高的siRNA-3瞬时转染入关节软骨细胞后，在胞外酸化条件刺激下观察关节软骨细胞外Ca2+内流情况，发现沉默组细胞Ca2+内流幅度明显低于模型组；3.将抑制效率最高的siRNA-3瞬时转染入关节软骨细胞，在胞外酸化条件刺激下观察各组细胞凋亡情况，同时观察软骨细胞分泌的Ⅱ型胶原含量及凋亡相关基因Bax、Bcl-2mRNA的相对表达水平。结果表明，与模型组相比，siRNA-3转染引起ASIC1a表达沉默后AA大鼠关节软骨细胞凋亡明显减少，Ⅱ型胶原表达量显著增多，并且沉默组Bax/Bcl-2比值较模型组明显下调。结论：1. siRNA转染可诱导大鼠关节软骨细胞ASIC1a表达沉默，是研究酸敏感离子通道对软骨细胞功能影响的可靠模型；2.基因水平干预ASIC1a表达可导致软骨细胞的细胞膜钙通透性降低；3. siRNA-3转染对胞外酸化刺激条件下大鼠关节软骨细胞的凋亡具有保护作用，其机制可能与其沉默ASIC1a的表达从而促进Bcl-2表达、抑制Bax的表达有关，提示酸敏感离子通道1a可能在AA大鼠关节软骨细胞的代谢过程中发挥着重要作用。