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背景和目的调节性B细胞(regulatory B cells,Breg)是近些年发现的具有免疫负调节功能的B细胞亚群,现已发现Breg在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、多发性硬化等多种自身免疫疾病中存在数量及功能异常,提示Breg在这些疾病的致病及发展过程中可能起到重要作用。PBC为典型的自身免疫性疾病,但免疫调节治疗如B细胞清除在PBC却未取得预期的疗效,另外B细胞清除在PBC动物模型中的试验结果也进一步提示除浆细胞外调节性B细胞在PBC致病及发展过程中也起到了重要作用,目前国内外缺乏PBC调节性B细胞功能状态的研究,因此本课题拟探究调节性B细胞在原发性胆汁性胆管炎免疫机制中的作用。方法收集PBC患者及健康对照外周血,分离PBMC,流式细胞技术测定CD19+CD24hiCD38hi(过渡 Breg)、CD19+CD27+CD24hi(记忆 Breg)、CD19+CD27intCD38+(浆母样Breg)占CD19+B细胞比例,同时测定各Breg表面分子CD80、CD86、CD40、IL21r表达情况。利用Leukocyte Activation Cocktail体外刺激孵育5小时后测定各Breg产IL10表达水平,加入IL21更改刺激条件,探究IL21对Breg产IL10的影响。结果1.本研究共纳入PBC患者23例,其中女性21例,男性2例,平均年龄为55±12.09岁,中位病程为24个月,纳入年龄、性别相匹配健康对照39例。2.PBC患者外周血记忆Breg占CD19+B细胞比例较健康对照组显著降低(9.57±5.97 VS 15.67±7.42 P<0.01),而过渡Breg占CD19+B细胞比例较健康对照组显著升高(5.90±3.2 VS 4.43±1.56 P=0.02),PBC患者与健康对照浆母样Breg占CD19+B比例无显著差异(1.50±1.13 VS 1.61±0.91 P=0.71),PBC患者成熟B细胞占C D19+B细胞比例较健康对照组显著升高(42.65±9.29 VS 37.09±7.22 P=0.02)。3.过渡Breg占CD19+B细胞的比例与TBA呈显著正相关(r=0.57,p=0.01),与Ig G呈显著正相关(r=0.61,p=0.01),与IgA呈显著正相关(r=0.66,p=0.00),与ESR呈显著正相关(r=0.61,p=0.02)。记忆Breg占CD19+B细胞比例与IgG、IgA、ESR成负相关,但是无显著性(r=-0.24,p=0.33;r=-0.36,p=0.13;r=-0.51,p=0.05)。4.PBC患者CD80在过渡Breg、CD19+B细胞表达比例较健康对照显著降低(1.31±1.26 VS 4.59±3.79 P=0.006,5.56±4.43 VS 9.78±5.95 P=0.046)。PBC 患者 CD86在浆母样Breg表达比例较健康对照显著升高(36.55±23.31 VS 14.65±14.06 p=0.007)。PBC患者CD40在过渡Breg表达比例较健康对照显著升高(5.13±4.96 VS 1.55±1.67 p=0.023),PBC患者CD40在记忆Breg细胞表面表达平均荧光强度较健康对照显著升高(68.01±22.06 VS 50.48±15.49 P=0.036)。PBC 患者 IL21r 在过渡 Br eg表达平均荧光强度较健康对照显著降低(218.00±67.00 VS 290.00±76.00 p=0.033)。5.记忆 Breg IL10 表达水平显著高于过渡 Breg(19.60±3.79 VS 11.62±1.97 p=0.000)。在相同条件下PBC各Breg产IL10水平较健康对照无显著差异。6.AC+21组浆母样Breg产IL10B细胞比例较AC组显著增加(21.80±9.02 VS 19.34±3.82 p=0.008),AC+21组过渡Breg、浆母样Breg产IL10的平均荧光强度较A C 组显著增加(150.80+23.30 VS 116.80+11.88 p=0.046,261.20+108.72 VS 200.40+51.66 p=0.002)。结论PBC患者外周血Breg 比例功能存在紊乱,过渡Breg 比例显著升高,而记忆Br eg比例显著减少,且过渡Breg与记忆Breg比例呈显著负相关。Breg水平与IgG、ESR、TBA有一定的相关性。Breg比例与CD80、CD86表达水平有一定相关性。P BC患者各Breg亚群表达IL10水平与健康对照相比无明显差异。IL21能提高Breg IL10表达水平,而PBC患者Breg IL21受体表达水平降低参与了 PBC Breg功能紊乱。