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获得性免疫缺陷综合征(Acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)即艾滋病，是由人免疫缺陷病毒(Human jmmunodeficiency Virus，HIV)感染引起的一种恶性传染病。自从1981年在美国首次发现该病以来，全球已有6 500多万感染病例，艾滋病还在以惊人的速度蔓延着，严重威胁人类的健康。HIV基因高度变异，逃避免疫监视，使得传统疫苗较难产生有效的免疫保护。核酸疫苗是从基因治疗领域发展起来的一种全新的免疫防治剂，可同时诱导细胞免疫应答和体液免疫应答，安全性好，构建灵活，成为一种非常有希望的艾滋病候选疫苗。pSFV1载体为衍生于塞姆利基森林病毒(Semliki forest virus，SFV)RNA复制子的真核表达载体，但此载体系统应用时需在体外将质粒DNA转录成RNA，操作很不方便，限制了其广泛应用。为此，本研究通过分子克隆技术，将SFV的复制子插入到真核表达载体pIRESneo的CMVie立即早期启动子和腺苷酸转录终止信号Poly(A)之间，构建了含塞姆利基森林病毒复制子的DNA表达载体pCS，改造后的载体可按常规DNA疫苗的方式进行制备、免疫，克服了原载体pSFV1体外转录制备RNA的弊端。将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因片段插入到pCS载体多克隆位点中，得到pCS-EGFP，用其转染BHK-21细胞，荧光显微镜下能观察到EGFP的表达产物增强型绿色荧光蛋白，表明该新型表达载体可以用于表达外源基因。为了探讨此新型载体pCS用于研制抗病毒疫苗的可能性，本研究选择HIV优势抗原表位，以HIV-1表位基因为基础，对抗原基因进行人工分子设计，将HIV多表位基因(Multiple-epitope gene，MEG)与HIV-1巨分子颗粒p24进行嵌合。从已构建保存的pVAX1-MEGp24酶切下HIV嵌合多表位MEGp24基因，克隆到pCS表达载体中，成功构建了含塞姆利基森林病毒复制子的HIV多表位核酸疫苗pCS-MEGp24。间接免疫荧光试验(IFA)检测表明MEGp24基因在转染BHK-21细胞中得到有效表达，RT-PCR可检测到MEGp24基因的转录产物mRNA。综上所述，本试验成功构建pCS-MEGp24核酸疫苗，证实了其可在真核细胞中表达目的基因，为其进一步深入研究和应用打下了基础。