臭灵丹和三七中主要有效成分的分析方法研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yulihui2638685
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本文包括两部分实验内容:臭灵丹中三种成分含量测定及HPLC指纹图谱研究;三七中皂苷的含量测定。采用L9(34)正交实验设计,在单因素实验的基础上,选择提取时间、料液比、溶剂体积分数3个主要因素,研究各因素交互作用对臭灵丹中冬青酸、洋艾素、臭灵丹酸的提取率的影响,优化臭灵丹中三种有效成分的超声提取方法。确定了臭灵丹中冬青酸、洋艾素、臭灵丹酸的超声法最佳提取工艺:提取时间为40min;料液比为1:4(g:mL);甲醇体积分数为90%。对采自云南德宏州同一时间不同地点的29批臭灵丹、以及采自云南省德宏州芒市同一地点不同时间的9批臭灵丹进行含量测定,结果表明:药材形状杆为白茎的含量相对高于紫茎的药材;且由于不同的生长环境和不同的采收时间,药材成分含量差异较大;其中11月份采摘的样品,三种有效成分的含量均为最高的。采用“一测多评”法测定了4批臭灵丹中三个活性成分的含量并与标准曲线法测得结果比较,发现“一测多评”法仅适用于结构类似物质的含量测定。根据民间用药经验及文献报道,选取10批臭灵丹药材建立了臭灵丹HPLC标准指纹图谱,该方法可靠,精密度、稳定性、重现性良好,可作为一定的标准对、臭灵丹药材质量评价。以该HPLC指纹图谱为标准,选出11批质量较好的药材进行抗流感病毒活性筛选,活性筛选结果与指纹图谱质控结果基本一致。相比较《中国药典》中单一地依靠洋艾素的含量来作为评判依据,该指纹图谱以其整体性与模糊性的优点,结合两种主要成分的含量测定结果,为臭灵丹的质量控制标准提供了进一步的科学依据。根据实验结果,草拟了臭灵丹药材标准草案。采用L9(34)正交实验设计,优化三七中皂苷的超声提取方法。明确了三七中4种皂苷的超声法提取最佳工艺参数是:提取时间为30min;料液比为1.0g/50mL;甲醇体积分数为60%。按照《中国药典》中三七含量测定项下要求,测定了云南省不同产地21批三七中三种主要皂苷的含量并根据实验结果做出评价。结果表明,产自云南省21批三七中三个主要皂苷含量均达到药典要求,具有较好的临床应用价值。其中大理云龙产地的三七样品中各皂苷含量均较高,且其皂苷总含量最高,具有较高的应用价值。采用实验室自制的HPLC色谱柱,实现了 Rg1和Re的基线分离,并对云南省21批三七中6种皂苷进行了含量测定。
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