高糖对大鼠心肌细胞PPARδ表达影响的研究

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目的:本研究旨在探讨高糖条件下体外培养的新生大鼠心肌细胞中过氧化物酶增殖物受体δ(PPARδ)表达的变化及其激动剂GW501516对心肌细胞功能及凋亡的影响。方法:研究对象为出生1-3d的SD大鼠。在无菌条件下取出其心脏并提取心肌细胞进行原代培养,根据不同的培养条件随机分为低糖培养基组、低糖培养基(含甘露醇组)、高糖培养基组及高糖培养基+GW501516溶液组进行培养。培养48h后,采用甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测心肌细胞的凋亡情况;采用3H-亮氨酸掺入的测定方法检测心肌细胞内蛋白质合成的变化;应用RT-PCR检测PPARδ mRNA的表达量变化,研究PPARδ及其激动剂GW501516对心肌细胞功能及凋亡的影响及可能的作用机制。结果:1、MTT法检测心肌细胞凋亡结果显示,高糖培养基组心肌细胞凋亡率明显高于低糖培养基组(P<0.01);低糖培养基(含甘露醇组)与低糖培养基组相比,心肌细胞凋亡率增加(P>0.05);与高糖培养基组相比,高糖培养基+GW501516组心肌细胞凋亡率减少(P<0.05)。2、3H-TdR掺入法检测心肌细胞内蛋白质合成的变化,高糖培养基组与低糖培养基组相比,高糖培养基组心肌细胞内蛋白质合成显著增加(P<0.01);低糖培养基(含甘露醇)组与低糖培养基组相比,心肌细胞内蛋白质合成减少不明显(P>0.05);与高糖培养基组相比,高糖培养基+GW501516组心肌细胞内蛋白质合成减少(P<0.05)。3、RT-PCR检测示高糖培养基组与低糖培养基组相比,PPARδmRNA表达水平降低(P<0.05);低糖培养基(含甘露醇)组与低糖培养基组相比,心肌细胞PPARδmRNA表达水平无明显改变(P>0.05);与高糖培养基组相比,高糖培养基+GW501516组心肌细胞PPARδmRNA表达水平升高(P<0.05),说明GW501516能够促进高糖条件下心肌细胞中PPAR8mRNA的表达。结论:1、高糖条件下体外培养的新生大鼠心肌细胞内PPARδ表达减少。2、高糖可能通过抑制心肌细胞内PPARδ表达而使细胞出现总蛋白含量及凋亡率增加。3.PPARδ激动剂GW501516可抑制高糖条件下心肌细胞内蛋白质合成及阻断高糖对心肌细胞凋亡的促进作用。
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