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经发根农杆菌(rhizogenes)转化的植株不仅表现出生根能力明显提高,而且通常还表现出叶片和花的形态、色素形成、节间长短、生活周期及向地性等性状的可遗传的变异,其中许多变异如植株矮化、节间缩短、花形和叶形改变等在园林植物品种改良中有很大的应用价值。本文拟通过发根农杆菌转化八宝景天(Sedum Spectabile Boreau)来获得转基因植株并且筛选优良新品种。采用八宝景天嫩茎作为外植体进行组织培养,在附加不同浓度激素的培养基上对其进行增殖、生根培养,诱导叶片愈伤组织的发生及叶片愈伤组织不定芽的分化,建立其叶片再生体系。在建立八宝景天叶片再生体系的基础上,研究影响八宝景天遗传转化的若干因素,通过遗传转化条件的优化,采用农杆菌介导法,建立了发根农杆菌遗传转化体系,获得了转基因植株。对转化再生植株进行了形态鉴定、PCR检测,并对转化植株形态及生长变异进行了初步研究,主要研究结果如下:1.叶片外殖体高效再生系统的建立:筛选出适宜八宝景天分化培养基是不附加任何激素的MS培养基,适宜生根培养基是不附加任何激素的1/2MS培养基,适宜诱导叶片愈伤组织发生的培养基是MS+6-BA 0.3mg. L-1+NAA 0.1mg. L-1,适宜诱导叶片愈伤组织不定芽分化的培养基是MS+6-BA 0.3mg. L-1+NAA 0.1mg. L-1。研究了暗培养对诱导叶片不定芽的影响,结果表明,暗培养5d有利于不定芽的诱导。2.头孢噻肟钠(CTX)对诱导八宝景天叶片不定芽的影响和对农杆菌的抑菌效果:确定适宜的CTX浓度为400 mg.L-1。3.影响农杆菌转化效率的几个主要因素:发根农杆菌活化次数、菌液浓度、侵染时间、共培养时间等对转化频率都有一定影响,在转化过程中菌株活化3次以上,菌液浓度OD600=0.4,侵染时间10min ,共培养2 d,有利于获得最高遗传转化效率。4.转基因植株的获得:利用介导法将发根农杆菌转入八宝景天叶片中,获得了转基因植株,对转基因植株进行了PCR检测,证明发根农杆菌Ri质粒已整合到八宝景天基因组中。5.转基因植株形态及生长变异的研究:发现与未经转化的八宝景天组培苗相比,大部分转基因植株矮化,茎分支能力增强,节间距缩短,生根系数增高,叶片颜色变黄。