局部注射维生素C对皮下脂肪组织形态学影响的研究

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目的通过在大鼠腹股沟脂肪垫注射不同浓度维生素C,观察维生素C对脂肪组织形态的影响,探讨维生素C对脂肪细胞数目及体积的调节作用及其机理,以期为软组织的修复与重建提供新的治疗手段或有益的启示。方法将80只SD大鼠随机分为空白对照组(D组,8只)、含0.06%维生素C的实验组(A组,24只)、含0.12%维生素C的试验组(B组,24只)、含0.24%维生素C的试验组(C组,24只),A、B、C组每组按注射后7d、21d、35d时取材又分三小组,每小组8只大鼠。将大鼠用2%的戊巴比妥钠(0.2mL/100g)腹腔注射麻醉后,每组随机选择左右侧腹股沟脂肪垫分为试验侧和对照侧,在两侧腹股沟区对称区域(以腹股沟为中线,长3.5cm,宽1.5cm区域内)局部均匀注射4mL的试剂。试验侧注射含维生素C的试剂,对照侧注射等量的不含维生素C的试剂,采取自身配对对照的方法,在注射7d、21d、35d后于腹股沟试验区域中间取皮肤及皮下组织作为标本,观察其大体形态和组织学改变、测量各组标本厚度;组织标本做HE染色,利用LeicaQ500MC显微病理图像分析系统对组织切片的脂肪细胞面密度、数密度,成纤维细胞数,血管数进行定量测定;采用TUNEL免疫组化法显示组织切片中的脂肪细胞调亡数目并计量。以上数据均以(?)±s表示,做相关统计学处理。结果1实验组SD大鼠的体重与空白对照组相应作用时间点比较差异无统计学意义(P>0.05);实验组与空白对照组的体重均随着作用时间的延长有增加的趋势(P<0.05)。2 B组、C组试验侧的标本厚度(皮肤及皮下脂肪组织)均较对照侧减少(P<0.05);A组试验侧的标本厚度与对照侧比较差异无统计学意义(P>0.05)。B组、C组的试验侧标本厚度均随着作用时间的延长有减少趋势(P<0.05);且C组试验侧的标本厚度较B组实验侧相应作用时间点减小(P<0.05)。3 HE染色病理切片观察,B、C组试验侧较对照侧均显示组织纤维化明显,脂肪组织变薄,脂肪细胞体积变小,数目减少,小部分细胞壁变形、破裂;而A组实验侧与对照侧比较未见明显的组织学改变。4 C组中21d和35d作用时间点实验侧的脂肪组织的血管密度均较对照侧增加且C21<C35(P<0.05);其余各试验侧的脂肪组织的血管密度均与对照侧比较差异无统计学意义(P>0.05)。5 B、C组试验侧的脂肪细胞面密度、数密度的计量均较对照侧减少(P<0.05);A组试验侧的脂肪细胞面密度、数密度的计量与对照侧比较差异无统计学意义(P>0.05)。B组、C组试验侧的脂肪细胞面密度、数密度的计量均随着作用时间的延长有减少趋势(P<0.05);且C组试验侧较B组实验侧相应作用时间点减小(P<0.05)。6 B、C组实验侧的成纤维细胞数目均较对照侧增加(P<0.05),A组试验侧的成纤维细胞数目与对照侧比较差异无统计学意义(P>0.05)。B、C组试验侧的成纤维细胞数目均随着作用时间的延长有增加趋势(P<0.05);且C组试验侧较B组实验侧的相应作用时间点增加(P<0.05)。7 B、C组实验侧的脂肪细胞的凋亡数目均较对照侧增加(P<0.05),A组试验侧的脂肪细胞的凋亡数与对照侧比较差异无统计学意义(P>0.05)。B、C组试验侧的脂肪细胞的凋亡数目均随着作用时间的延长有增加趋势(P<0.05);且C组试验侧较B组实验侧相应作用时间点增加(P<0.05)。结论在大鼠局部脂肪组织注射含0.12%和0.24%维生素C的试剂可促进脂肪细胞脂质分解,数目减少,诱发脂肪细胞的凋亡,进而使得脂肪组织萎缩;对局部成纤维细胞和血管数目的增加有一定的促进作用。并且上述作用有明显的浓度依赖性和时间依赖性。而局部注射含0.06%维生素C的试剂对脂肪组织形态学无明显影响。
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