ENT1在人肝癌细胞中的表达特征

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目的:探讨ENT1在不同人肝癌细胞株及不同细胞周期中的表达特征。方法:1.体外培养的人肝癌细胞HuH-7、HepG2和Hep3B并选择人乳腺癌细胞MCF-7对照,采用免疫荧光法检测肝癌细胞中ENT1的定位表达。2.RT-PCR法检测肝癌细胞和乳腺癌细胞中ENT1mRNA的表达。3.将人肝癌细胞HuH-7分为两组(对照组用浓度为0μmol/L Roscovitine培养,实验组用浓度为32μmol/L Roscovitine培养)采用流式细胞术分别检测两组体外培养的人肝癌细胞HuH-7细胞周期时相的分布。4.RT-PCR法检测人肝癌细胞HuH-7不同周期ENT1mRNA的表达特征。结果:1.免疫荧光法结果显示,三株人肝癌细胞膜上均可见较高的ENT1表达。2.逆转录PCR发现,肝癌细胞中ENT1mRNA的表达水平均高于乳腺癌细胞,不同肝癌细胞株中ENT1mRNA的表达水平存在差异。3.流式细胞仪检测发现,经浓度为32gmol/L的Roscovitine干预24h后的体外培养的人肝癌细胞HuH-7处于Go/Gl期细胞比例升高(76.29±0.34%vs58.50±0.33%,P<0.05),S期细胞比例减少(25.55±0.15%vsl5.19±0.34%,P<0.05)、G2/M期细胞比例减少(16.35±0.31%vs8.51±0.41%,P<0.05)4.细胞被阻滞在Go/Gl期后,ENT1mRNA的表达水平明显上调。结论:1.人肝癌细胞膜上存在较高的ENT1表达。2.肝癌细胞中ENT1mRNA的表达水平均高于乳腺癌细胞,不同肝癌细胞株中ENT1mRNA的表达水平存在差异。3.处于G0/G1期的细胞,ENT1mRNA的表达水平明显上调。
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