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目的:观察尼妥珠单抗(Nimotuzumab,h-R3)联合吉西他滨和(或)放疗对人胰腺癌PANC-1细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。 方法:实验分组为对照组(C)、单用尼妥珠单抗组(h-R3)、单纯照射组(R)、吉西他滨加放疗组(G+C)、尼妥珠单抗联合放疗组(h-R3+R)、尼妥珠单抗联合吉西他滨和放疗组(h-R3+G+R)。 (1)取对数生长期细胞进行细胞生长曲线的测定。 (2)采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法观察尼妥珠单抗联合吉西他滨和放疗对细胞生长增殖的影响,评价三者联合效应。 (3)流式细胞仪(FCM)检测尼妥珠单抗联合吉西他滨和(或)放疗对各实验组PANC-1细胞的凋亡率及细胞周期分布的影响。 结果: (1)PANC-1细胞在接种后第2-7天呈对数生长,此阶段最适合进行细胞生长实验。 (2)h-R3组细胞的抑制率为2.36±2.08%,与空白对照组(C)组相比无明显差异;h-R3+R组细胞的抑制率为51.19±16.26%,与单纯照射组(R)的抑制率27.03±13.53%相比较,存在显著差异(p<0.05);h-R3+G+R组PANC-1细胞的抑制率为60.81±15.53%,与吉西他滨加放疗组(G+R)的抑制率41.48±14.76%相比较有明显差异(p<0.05);同时,在同一实验组别,不同照射剂量(2Gy、4Gy、8Gy)下,细胞抑制率分别为R组(13.24±4.56%、25.82±9.29%、42.04±3.81%);G+R组(24.93±2.43%、40.96±5.79%、58.57±4.68%),h-R3+R组(32.40±1.62%、50.99±4.35%、70.19±4.57%),h-R3+G+R组(42.14±6.33%、62.51±2.05%、77.77±3.02%)。 (3)对照组PANC-1细胞凋亡率最低为1.12±0.08%,h-R3组、R组、G+R组细胞凋亡率依次为3.94±0.16%、5.55±0.16%、6.47±0.31%,它们与C组棚比均有统计学差异(p<0.05)。h-R3+R组的凋亡率为8.81±0.09%与R组5.55±0.16%比较存在统计学差异(p<0.05),h-R3+G+R组11.58±0.40%与G+R组6.47±0.31%比较有统计学差异(p<0.05)。 (4)空白对照组(C)的细胞分布为(G0/G1期56.96±0.15%、S期31.90±0.10%、G2/M期11.13±0.15%),尼妥珠单抗组细胞周期分布与对照组相似,其周期分和为((G0/G1期59.57±0.51%、S期28.18±0.72%、G2M期12.25±0.22%),R、G+C、h-R3+R、h-R3+G+R组细胞的G2/M期比例逐渐升高依次分别为18.57±0.51%、30.93±0.64%、34.11±1.09%、40.95±0.8%。 结论: (1)尼妥珠单抗本身无明显抑制胰腺癌细胞株PANC-1细胞生长的作用; (2)尼妥珠单抗可增强单纯照射以及吉西他滨和放疗联合组对细胞株PANC-1的生长抑制作用; (3)尼妥珠单抗对放化疗的增敏机制可能与它促进PANC-1细胞凋亡增加、诱导PANC-1发生G2/M期阻滞等因素有关。