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目的：（1）初步摸索基于Gateway克隆技术的慢病毒表达系统；（2）建立稳定的转入小鼠bFGF的CHO-K1细胞株，并检测其bFGF的表达。 方法：（1）按Gateway技术要求设计引物，以C2C12的cDNAs为模板，PCR获得相应的attB-bFGF-attB形式的基因；（2）利用Gateway技术经过BP和LR两步反应获得表达克隆；（3）通过慢病毒包装系统在293FT细胞中包装出含有bFGF的慢病毒；（4）用重组bFGF-慢病毒感染CHO-K1细胞，并筛选单克隆：（5）在基因组水平、cDNAs水平和蛋白水平，应用PCR和Western Blot等技术检测并比较转与不转外源bFGF的CHO-K1细胞bFGF的表达情况；应用MTT生物活性检测法检测并比较转与不转外源bFGF的CHO-K1细胞培养上清的活性。 结果：（1）应用Gateway技术成功构建了pDONR-bFGF入门克隆，和pLenti6／V5-bFGF表达克隆；（2）应用慢病毒包装系统包装出了重组bFGF-慢病毒，并成功感染了CHO-K1细胞，筛选出了单克隆；（3）通过在基因组水平、cDNAs水平和蛋白质水平的检测，证实外源bFGF成功整合到了CHO-K1细胞的基因组中，且外源bFGF的转入提高了CHO-K1细胞株bFGF的表达；MTT活性检测结果显示转入外源bFGF的CHO-K1细胞培养上清比没有转入外源bFGF的CHO-K1细胞培养上清的活性增强。 结论：（1）在本实验室初步建立了基于Gateway克隆技术的慢病毒表达系统；（2）外源bFGF基因成功整合进入了CHO-K1细胞的基因组，并且能够稳定表达外源bFGF；（3）转入外源bFGF的CHO-K1细胞比没有转入外源bFGF的CHO-K1细胞有更高的bFGF表达，且MTT活性检测结果提示其分泌bFGF也可能增强。