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为了缓解新疆饲草资源短缺的现状,更合理利用葡萄籽资源,本研究通过体外试验分析葡萄籽对多浪羊瘤胃发酵指标和瘤胃饲料降解率的影响,在体外试验的基础上进行饲养试验,分析日粮中添加不同比例葡萄籽对多浪羊营养物质表观消化率、能量代谢参数、瘤胃发酵参数、消化酶活性浓度、血液指标和瘤胃细菌真菌菌群结构的影响,旨在探索葡萄籽在日粮中的适宜添加范围,为葡萄籽资源的合理利用提供理论依据。试验一:全价日粮配制不同比例葡萄籽(0%、4%、8%、12%、16%、20%、24%和28%)加入多浪羊瘤胃液进行发酵,采用体外产气监测系统记录各比例饲料的48 h产气量(GP),收集发酵液,测定pH、氨态氮(NH3-N)和菌体蛋白(MCP)浓度;运用体外尼龙袋法分析各比例饲料的营养物质降解率及发酵液pH、NH3-N浓度变化。结果表明:随着葡萄籽添加比例的增加,发酵液pH升高,GP先增长后减少,16%添加组48 h潜在GP高于0%添加组(P<0.05);0%、4%和8%添加组MCP浓度高于其余各组(P<0.05),16%添加组NH3-N浓度低于0%添加组(P<0.05);尼龙袋试验中,添加16%以上的葡萄籽降低了DM和CP的有效降解率(P<0.05)。试验二:选用15只健康、1.5岁左右、体重41.0±1.0 kg、安装永久瘤胃瘘管的多浪羊羯羊,将试验羊随机分成5组,分别饲喂添加0%(D1组)、4%(D2组)、8%(D3组)、12%(D4组)和16%(D5组)葡萄籽的全混合日粮。采用全收粪尿法收集粪尿,并通过采食量与营养物质排出量之间的关系计算各组的干物质(DM)、有机物(OM)、氮(N)、脂肪(EE)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)的表观消化率及能量代谢参数。结果表明:D5组的DM和OM表观消化率显著低于D1组(P<0.05),NDF的表观消化率为D5组显著低于D1组(P<0.05),D5组氮存留率显著低于D3和D4组(P<0.05),D4组ADF和EE表观消化率最高,但各组间差异不显著(P>0.05);总能消化率和总能代谢率变化规律相同(D2>D1>D4>D3>D5),消化能代谢率为D1>D4>D2>D5>D3,但各组间无显著差异(P>0.05)。试验三:在试验二日粮的基础上,分时间点采集瘤胃液测定瘤胃液的pH、NH3-N、挥发性脂肪酸(VFA)和消化酶活性浓度;在晨饲前采集劲静脉血,测定血液指标。结果表明:(1)日粮葡萄籽水平对采食后各时间点NH3-N浓度无影响(P>0.05),但可显著升高瘤胃液pH(P<0.05);瘤胃液中总挥发性脂肪酸(TVFA)相对含量随日粮中葡萄籽比例的增加而降低,D4、D5组日粮中瘤胃液TVFA的相对含量显著低于D1、D2、D3组(P<0.05)。日粮葡萄籽水平改变瘤胃液TVFA中的乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、异戊酸的比例,D4、D5组乙酸/丙酸值显著小于D1、D2、D3组(P<0.05)。(2)D3和D4组日粮可提高瘤胃液α-淀粉酶和蛋白水解酶活性浓度(P<0.05)。(3)D5组多浪羊血液中白细胞数目、中性粒细胞数目显著高于各组(P<0.05),D4和D5动物血清肌酐含量显著高于D1、D2、D3组(P<0.05),血液的抗氧化能力随着日粮中葡萄籽的添加比例的增加而升高,D5组日粮显著提高动物血液中SOD(超氧化物歧化酶)、MDA(丙二醛)、T-SOD(总超氧化物歧化酶)活性(P<0.05)。试验四:在试验二的日粮基础上,晨饲前采集瘤胃食糜,采用illuminam miseq测序平台进行高通量测序。结果表明:(1)日粮中添加葡萄籽对瘤胃细菌菌群丰富度无显著影响,但16%的葡萄籽使瘤胃真菌的菌群丰富度增大(P<0.05)。(2)细菌门水平上的绝对优势菌属为拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes),两个菌门相对丰度和在89.56%92.85%。细菌属水平上的绝对优势菌属为普雷沃氏菌属-1(Prevotella1),其中瘤胃球菌属1(Ruminococcus1)和克里斯滕森菌科R-7(ChristensenellaceaeR-7group)的相对丰度随日粮中葡萄籽比例的上升而降低(P>0.05)。(3)多浪羊瘤胃真菌的绝对优势菌门为新丽鞭毛菌门(Neocallimastigomycota)和子囊菌门(Ascomycota),两个菌门在瘤胃真菌门中总相对丰度在90.18%96.13%,D2组新丽鞭毛菌门的相对丰度较D1组增加13.92%(P<0.05),子囊菌门的相对丰度较D1组降低了33.69%(P<0.05)。真菌属水平上的绝对优势菌为根囊鞭菌属(Anaeromyces),D5组根囊鞭菌属相对丰度最低为15.93%,比D1组低68.29%,瘤胃壶菌属(Piromyces)随日粮葡萄籽的比例增加先降低,然后升高,D3组最低点,低于照组79.68%。D3组未注释-肉座菌目、unclassifiedpAscomycota、Latorua相对丰度显著高于另外4组(P<0.05)。结论:(1)体外试验中,全价日粮中添加8%16%的葡萄籽可以提高饲料的产气量,但全价日粮值中添加16%以上的葡萄籽降低了营养物质的降解率,使瘤胃液pH升高。因此,体外试验中绵羊日粮中葡萄籽的适宜添加范围应为8%12%。(2)饲养试验中,日粮中添加16%的葡萄籽不利于多浪羊营养物质的消化;4%8%的葡萄籽可提高瘤胃中淀粉和蛋白质的消化;16%以上的葡萄籽添加量不利于动物的身体健康;日粮中添加葡萄籽可提高动物的抗氧化能力;葡萄籽的添加比例未改变瘤胃细菌和真菌的菌群结构。综上,日粮中添加葡萄籽的比例应在12%以下,建议添加比例为4%8%。