背景和目的对乙酰氨基酚（acetaminophen,APAP）能引起广泛的肝脏损伤和氧化应激反应,而维生素D具有抗炎和抗氧化应激的作用。近期有研究表明维生素D补充能改善APAP诱导的大鼠肝脏氧化应激和炎症反应,但维生素D缺乏能否加重APAP诱导的急性肝损伤和氧化应激尚不清楚。本研究的目的是建立维生素D缺乏加重APAP诱导的肝损伤模型,研究维生素D缺乏对肝脏氧化应激的作用及其可能机制。方法将96只ICR小鼠（雄性）随机分为维生素D缺乏组（VDD）和对照组（Ctrl）,每组48只。VDD组小鼠喂养维生素D缺乏饲料,Ctrl组喂养标准饲料。6周后,将小鼠随机分为4组:Ctrl组、APAP组、VDD组、VDD+APAP组。APAP组和VDD+APAP组腹腔注射亚致死剂量APAP（150 mg/kg）。Ctrl组和VDD组腹腔注射相同剂量的生理盐水。在APAP给药前给予小鼠标准化禁食12 h。分别在给药后2 h、6 h、24 h后剖杀。取材时记录小鼠体重,肝重。留取血清样本用于检测血清25（OH）D水平,谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）和谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）。取肝脏的组织,一部分存放在多聚甲醛中固定用于HE染色,一部分冻存在-80度冰箱用于后续检测GSH、MDA和WB相关蛋白Ho-1、NOX-2、3-NT,另一部分冻存用于RT-PCR检测Gshpx、Sod1、Cat和Ho-1。为研究维生素D缺乏对APAP诱导的小鼠生存率的影响,我们将20只小鼠分为APAP组和VDD+APAP组。所有小鼠均腹腔注射致死剂量的APAP（300mg/kg）。观察小鼠7天的存活率。结果与Ctrl组的小鼠相比,维生素D缺乏的小鼠血清25（OH）D水平显著降低。各组间小鼠体重没有显著差异。APAP组在APAP处理24小时后肝脏重量和肝体比相对Ctrl组有增加,APAP+VDD组的肝脏重量和肝体比高于APAP组。APAP组血清ALT和AST轻度升高。VDD加重了APAP诱导的血清ALT和AST升高。APAP处理不同时间后,均可见肝脏组织轻度结构紊乱和坏死。VDD显著增加了APAP诱导的肝脏坏死面积。进一步的实验表明,VDD加剧了APAP诱导的肝脏GSH耗竭和脂质过氧化。此外,APAP诱导的肝脏血红素加氧酶-1（Ho-1）、谷胱甘肽过氧化物酶（Gshpx）、超氧化物歧化酶1（Sod1）和过氧化氢酶（Cat）等抗氧化基因表达上调。APAP组Ho-1、NOX-2和3-NT蛋白水平仅有轻微升高或没有变化,VDD加重了APAP诱导升高。我们分析了VDD对小鼠生存率的影响,两组的存活率无明显差异。结论本研究探讨了维生素D缺乏在APAP诱导的急性肝损伤中的作用,研究结果发现:亚致死剂量APAP仅引起轻微的肝损伤,维生素D缺乏会加重APAP诱导的肝损伤;维生素D加重肝脏氧化应激;维生素D缺乏可能通过增加Ho-1、NOX-2和3-NT等加重APAP诱导的肝脏氧化应激。