急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中caspase-8表达及其与时间相关性的研究

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目的:研究大鼠急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中caspase-8表达的动态变化,探讨急性β射线皮肤损伤创面难以愈合的机制,为临床治疗提供一定的理论依据。方法:雌性SD清洁级大鼠54只,随机分为3组。照射组,n=24,直线加速器产生的β射线(45Gy)单次照射大鼠臀部皮肤40mm×30mm,建立急性β射线皮肤损伤动物模型;切创组,n=24,在无菌条件下于后臀部纵行做一15mm长皮肤全层切口,建立大鼠普通创伤动物模型,作为普通创伤对照;对照组,n=6,正常大鼠。取不同时期皮肤创面组织,采用免疫组织化学、Western blot等检测方法,观察不同时相点各组大鼠创面局部凋亡变化及caspase-8的变化。结果:①照射组:大鼠照射后2周开始脱毛,3周局部皮肤出现红肿、水疱,4周出现创面,并逐渐增大,5周创面不再增大。切创组:伤口呈现常规愈合过程。②免疫组化显示:大鼠表皮基底层、棘层、颗粒层细胞及毛囊、皮脂腺、汗腺上皮细胞caspase-8均呈阳性染色并表达位于细胞浆,用DAB显色呈棕黄色。照射组创面出现后0、1、2、3周caspase-8的积分吸光度(IA)值明显高于切创组,其中照射组创面出现后2周caspase-8表达水平最高,两者差异有统计学意义(p <0.05)。③Western blot结果显示:照射组创面出现后0、1、2、3周caspase-8的光密度比值明显高于切创组,两者差异有统计学意义(p <0.05)。④在β射线皮肤损伤创面愈合过程中,随着细胞凋亡的增加,caspase-8的表达明显增强,并且与细胞凋亡发生频度具有良好的相应关系。结论:①急性β射线皮肤损伤创面细胞凋亡比普通创伤出现频度较高、持续时间长,可能是导致创面难以愈合的重要原因之一。②大鼠急性β射线皮肤损伤创面愈合过程中,caspase-8起重要调控作用。③根据caspase-8的表达规律,推测β射线皮肤损伤的时间,进一步配合临床治疗。
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