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目的:以多巴胺(DA)、肾上腺素(E)和去甲肾上腺素(NE)为检测对象,研究能活化被5-羟色胺(5-HT)、NADH、组氨等物质污染的碳纤维微电极的方法;在抗污染的基础上,通过电流校正的方法达到定量检测5-羟色胺的目的;用氧化还原法或纳米材料电沉积法修饰碳纤维微电极(CFME)进一步提升微电极对儿茶酚类神经递质的检测灵敏度,并将上述检测方法应用于生物样本的高灵敏检测。方法:(1)采用电沉积法将氧化石墨烯修饰到已被5-羟色胺(5-HT)毒化的CFME表面,用循环伏安法(CV)和差分脉冲伏安法(DPV)研究了多巴胺(DA)在该修饰电极上的电化学行为,考查了该电极的电化学性能,并优化氧化石墨烯的电沉积时间及电压,达到最佳的活化效果。(2)将制备好的CFME置于1.0×10-4mol/L5-羟色胺溶液中循环伏安扫描10圈后,测定电极在铁氰化钾、多巴胺等电活性溶液中的循环伏安以及差分脉冲图的峰电流变化,采用火焰灼烧法对被5-羟色胺毒化的电极进行活化,定义活化后电极与原电极在铁氰化钾溶液中的峰电流之比为校正因子,对电极的活性面积进行校正,用校正后的氧化峰电流绘制5-羟色胺测定的工作曲线。(3)采用电流-时间曲线法在纯水中对已被5-羟色胺(5-HT)毒化的CFME进行再生活化,通过扫描电镜(SEM)以及X射线能谱分析法(EDS)表征电极表面结构及形貌,探讨该法活化再生碳纤维电极的机理。(4)在超纯水中采用恒电位电沉积的方法,在CFME表面修饰含氧基团(RO);再采用恒电位法在传感界面负载聚二烯二甲基氯化铵(PDDA)为保护剂制备的纳米金粒子(AuNPs),制得RO/PDDA-AuNPs/CFME修饰电极。利用扫描电子显微镜对修饰前后CFME的表面形貌进行了表征,采用循环伏安法及差分脉冲法探讨了修饰电极在DA溶液中的电化学行为。(5)采用纳米金修饰碳纤维微电极,修饰电极对芦荟多糖具有良好的电催化活性,通过在活体芦荟植株凝胶中插入该修饰电极,对不同生长条件下芦荟植株中的芦荟多糖进行动态监控,从而评价芦荟多糖对植株应激外界环境的含量变化。结果:(1)实验结果表明,在20 mmol/L,pH为7.2的Tris-HCl缓冲溶液中,使用氧化石墨烯修饰的再生电极对多巴胺、去甲肾上腺素具有良好的电化学响应。在优化条件下,利用DPV法进行测定,DA的氧化峰电流与其浓度在0.1100μmol/L呈良好的线性关系,检测限达0.1μmol/L。(2)实验结果表明,校正后的5-羟色胺氧化峰电流与其浓度在1.0×10-62.0×10-44 mol/L范围内呈现良好的线性关系,线性回归方程为I(nA)=0.2073 C(μmol/L)+0.3074,相关系数R2=0.9962,用该方法对5-羟色胺样品浓度进行了测定,回收率达到98.0%102.4%。该方法操作简单,重现性好,有望用于生物样品中5-羟色胺的检测。(3)实验结果表明,CFME表面的绝缘膜可以通过恒电位电沉积法去除。采用电流-时间曲线法于纯水中向CFME施加1.5V的初始电压,经电活化处理的CFME在神经递质中的氧化还原峰电流显著增加。实验结果表明,电极活化归因于电化学氧化刻蚀除去电极表面绝缘层,此外,在电化学处理过程中,电极表面形成含氧官能团(如羟基,羧基,羰基,内酯),提高了碳纤维电极表面的润湿性和亲水性,促进多巴胺在电极表面的聚集。利用DPV法进行测定,DA的氧化峰电流与其浓度在1.0×10-7-1.0×10-44 mol/L呈良好的线性关系,检测限为3.1×10-88 mol/L。再生的CFME非常稳定并且具有优异的灵敏度和选择性,可用于监测复杂生物微环境中的神经递质。(4)实验结果表明:在20 mmol/L pH 7.0的Tris-HCl缓冲溶液中,复合修饰膜RO/AuNPs-PDDA对DA具有显著的电催化氧化活性。在优化条件下,采用差示脉冲伏安技术对多巴胺进行定量分析,实验结果表明DA的氧化峰电流与其浓度在1×10-7-5×10-5mol/L范围内呈良好的线性关系,线性相关系数R2=0.9912,检测限为3.3×10-8mol/L(S/N=3)。该修饰方法重现性好,电极稳定性佳,制备方便,可广泛应用于生物样品中DA的高灵敏分析。(5)纳米金粒子修饰后的CFME和金电极对芦荟储水凝胶组织中芦荟多糖的电催化活性增强,不同环境下芦荟植株中芦荟多糖含量的动态水平变化具有显著的统计学差异,能作为衡量芦荟光合作用强度的一个指标。