牙周炎是由牙周致病菌感染引起的慢性炎症性疾病,不同国家、地域、民族以及不同年龄的人均可患病,牙周病在我国患病率高达80%～90%,已成为成年人失牙的主要原因[1]。作为引起牙周炎主要的致病菌之一的牙龈卟啉单胞菌,可产生多种毒力因子,同时引起牙体周围软、硬组织的炎症破坏。巨噬细胞作为固有免疫的重要组成部分,是执行固有免疫的效应细胞,并广泛分布于组织中。近年研究提示,牙周炎作为一种感染性疾病,其牙周致病菌激发的牙周固有免疫应答可引起牙周软硬组织的炎症及破坏。寡核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODN)是含数十个核苷酸单体的多核苷酸链,可通过受体介导的方式被细胞摄取进而发挥作用。通过对ODN的人工设计合成并加以修饰,使其具有化学稳定性,可快速进入免疫细胞,激活体内免疫系统,诱导快速的抗感染免疫应答。通过对ODN的磷酸硫代化修饰,使ODN可以抵抗核酸酶的消化作用,同时具有体内稳定性,还能提高细胞的摄取率。由于ODN具有低生物毒性、易于人工合成和化学性质稳定的特性,成为近年来免疫学等基础医学领域的研究焦点。因此,本研究在体外模拟炎症微环境条件,通过检测在不同序列ODN作用下,牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)刺激的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞相关炎症介质表达水平的变化,探讨特定序列ODN对Pg-LPS刺激RAW264.7细胞炎症介质表达的影响。方法:选取小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞,用HG-DMEM培养基进行复苏、培养,传代,备用。取对数生长期的RAW264.7细胞接种于细胞孔板中,以工作浓度10μg/ml的Pg-LPS刺激RAW264.7细胞,同时分别加入命名为MTO1、MS19、YW001、FC004、YW002,2006的不同序列ODN(工作浓度1μg/ml),以等体积PBS作为空白对照组,仅用Pg-LPS刺激RAW264.7细胞为阳性对照组,CCK8法检测ODN对Pg-LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞活性的影响,ELISA检测ODN对Pg-LPS刺激RAW264.7细胞特异性相关炎症因子TNF-α和IL-6表达的影响。微板法检测ODN对Pg-LPS刺激RAW264.7细他NO表达的影响。结果:与Pg-LPS组相比,12h和24,MTO1和MS19可抑制TNF-α和IL-6的表达;48h,MTO1、MS19、YW001、FC004、YW002和2006均抑制NO的表达;72h,MTO1、MS19、YW001、FC004、YW002和2006均抑制NO的表达。结论:(1)MT01和MS19在炎症早期下调RAW264.7细胞TNF-α和IL-6的表达,在炎症晚期下调RAW264.7细胞NO的合成。(2)YW001、FC004、YW002和2006在炎症晚期下调RAW264.7细胞NO的合成。