【摘 要】
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目的探讨细胞凋亡信号调节蛋白1 (apoptosis signal regulating kinase 1, ASK1)在损伤的大鼠脊髓星形胶质细胞增生中的作用。方法由原代培养得到高纯度(>98%)的大鼠脊髓星形
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目的探讨细胞凋亡信号调节蛋白1 (apoptosis signal regulating kinase 1, ASK1)在损伤的大鼠脊髓星形胶质细胞增生中的作用。方法由原代培养得到高纯度(>98%)的大鼠脊髓星形胶质细胞,建立星形胶质细胞损伤模型。星形胶质细胞损伤模型建立后立即给予生理盐水(损伤模型组)、ASK1特异性抗体(Anti-ASK1 antibody组)、ASK1特异性抑制剂(Thioredoxin, Trx组)处理,对照组为原代培养的大鼠脊髓星形胶质细胞,不作任何处理。损伤处理后1h、6h、21h 24h、72h应用蛋白质印迹技术检测星形胶质细胞标志蛋白胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)和波形蛋白(Vimentin, Vim) 的表达情况,应用CCK-8技术检测星形胶质细胞的增殖活性,损伤处理后12h、24h、72h应用免疫荧光标记技术检测星形胶质细胞划痕宽度的变化。结果损伤处理后24h及72h损伤模型组GFAP和Vim的表达均显著高于对照组、Anti-ASK1 antibody组、Trx组(P<0.01);损伤处理后24h及72h损伤模型组星形胶质细胞的划痕平均宽度明显小于对照组、Anti-ASK1 antibody组和Trx组(P<0.01);损伤处理后12h、24h、72h对照组、Anti-ASK1 antibody组和Trx组星形胶质细胞增殖活性明显低于损伤模型组(P<0.05)。结论大鼠脊髓星形胶质细胞损伤后阻断ASK1可抑制其细胞增生。
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