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氢能是一种理想的可再生清洁能源,被认为是最具发展潜力的未来能源之一。光合细菌生物制氢技术能够将有机废水的处理和氢气制备有效地结合起来,被认为是一种很有发展前景的可持续制氢方法。然而,要实现工业化生物制氢还需要进一步提高制氢的效率。 本文以光合细菌Rhodopseudomonas palustrisPB-Z为研究对象,主要研究了环境因素对光合细菌生长和产氢的影响并初步探索了光合细菌产氢过程中的部分代谢过程。实验结果表明:(1)搅拌能促进光合细菌的生长和产氢,不同的搅拌速度对光合细菌生长的促进作用几乎相同,但对产氢的影响很大。在240 rpm搅拌的条件下,产氢培养液中的氢气泡能较快地逸出到气相中,使产氢培养液中的氢分压减小,促使光合细菌产氢反应向正反应方向进行。(2)光波长对光合细菌PB-Z生长的影响较小,其中红光最有利于光合细菌PB-Z的生长,白炽灯和黄光略优于绿光和蓝光。在搅拌和不搅拌的条件下,光波长对光合细菌产氢的影响不同:在不搅拌时,白光>黄光>绿光>蓝光>红光;在搅拌条件下,白光>黄光≥蓝光≥红光>绿光。(3)光合细菌 PB-Z最佳的生长温度和产氢温度都是35.0℃。在35.0℃、240 rpm的条件下,其最大产氢速率和产氢总量分别是78.7 ml/L/h和1728.1 ml H2/L。(4)一定浓度的Fe2+或Ca2+会引起光合细菌 PB-Z出现絮凝现象。在不搅拌的条件下,Fe2+或 Ca2+引起的絮凝作用对光合细菌产氢能力的促进作用十分明显,而在搅拌条件下,则无明显的促进作用。(5)以葡糖糖为碳源时,所产气体中 H2和 CO2含量分别为55%和45%左右,而以丙酮酸为碳源时,所产气体中H2含量只有4.1%,而CO2的含量高达95.9%,并且以葡萄糖为碳源进行产氢时,光合细菌细胞内丙酮酸的浓度与光合细菌所产气体中CO2的浓度密切相关,呈线性关系,说明光合细菌所产的CO2有可能直接来源于丙酮酸的代谢。(6)在产氢过程中缺乏NH4+-N时,光合细菌PB-Z会将一部分尿素转化为NH4+-N,以满足生长代谢对NH4+-N的需求。(7)利用柱型环式光反应器进行产氢实验时,产氢量和最大产氢速率比小型反应器略有下降,可能与该反应器的搅拌动力不足和培养基深度增大导致气体逸出的难度增大有关。(8)在缺乏维生素时,光合细菌PB-Z无法利用小分子酸产氢。而且光合细菌PB-Z不能利用谷氨酸生长和产氢,能够利用尿素和氯化铵为氮源进行生长和产氢,但是硫酸铵中的NH4+会抑制光合细菌PB-Z的产氢活性。(9)碳源浓度、氮源浓度和C/N对光合细菌PB-Z产氢的影响是相互作用的,在尿素浓度较高的条件下(N含量为0.02 mol/L),C/N=3.5时,光合细菌的产氢活性较大,C/N增大至10.5时光合细菌就失去产氢活性;而在尿素浓度较低的条件下(N含量为0.003 mol/L),C/N=10时,光合细菌的产氢活性最大,而且具有连续产氢的潜力。综上所述,该菌具有优良的产氢性能。