【摘 要】
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副猪嗜血杆菌(Hps)是猪格拉泽氏病的病原体，引起猪的多发性浆膜炎，关节炎，脑膜炎，肺炎和败血症。本文从广东省具有上述临床症状的不同患病猪群的病灶中分离到两株革兰氏阴性
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副猪嗜血杆菌(Hps)是猪格拉泽氏病的病原体，引起猪的多发性浆膜炎，关节炎，脑膜炎，肺炎和败血症。本文从广东省具有上述临床症状的不同患病猪群的病灶中分离到两株革兰氏阴性细小杆菌，通过培养特性试验和生化试验初步证明该两株分离物为Hps野毒株，命名为TP株和HN株。将两株分离株分别腹腔接种小白鼠进行毒力试验，结果说明两分离株具有致病性。对两株分离株进行18种药物的敏感性试验。
胸膜肺炎放线杆菌(APP)是传染性胸膜肺炎的病原体，APP在临床上和猪格拉泽氏病非常相似，两病还可以并发，与Hps同属于巴斯德菌科嗜血杆菌属，核苷酸同源性较高，两种菌都具有编码铁转结合蛋白A(tbpA)基因。根据APP和Hps的tpbA基因的核苷酸序列设计合成了一对引物，建立了鉴别APP和Hps的特异的PCR方法。同时对PCR的反应条件进行了优化。对退火温度，退火时间，延伸时间，循环次数进行试验。用本文建立的方法对本实验室保存的APP野毒株JH株，和Hps分离株HN株进行检测。
采用了克隆与测序的方法对JH株的五重PCR产物进行鉴定，将PCR产物回收转化后测序，测序结果经BLAST分析表明，3条特异性条带都是目的片段的基因序列，证明扩增产物为目的基因片段。
本文建立的对APP的多重PCR基因分型方法整个过程可在28个小时内完成，且该检测方法特异性强，敏感性高，重复性和稳定性良好。
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