利用EMS诱导小麦—华山新麦草染色体易位的研究

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近年来,随着用于小麦杂交的亲本越来越单一,加上小麦自身变异较小,导致小麦的遗传基础越来越狭窄,在主要产量性状的育种上进展缓慢。华山新麦草是小麦的近缘属种,蕴藏着丰富的遗传变异,含有许多抗病、抗逆的优益基因。因此通过远缘杂交的手段将华山新麦草的染色体导入小麦中,可以丰富小麦的遗传基础,拓宽小麦的育种途径,为小麦育种提供更多优异的种质。目前,已通过染色体工程的手段获得了一整套的小麦-华山新麦草异附加系、部分异代换系和易位系。相对于小麦附加系和代换系,易位系是利用外源染色体片段最好的途径。易位的诱导方法主要有电离辐射、杀配子染色体、组织培养、通过染色体错分裂和利用遗传控制体系来诱导易位等。小麦种质24-3-1是小麦-华山新麦草衍生后代,前期利用田间农艺性状调查、细胞学观察和原位杂交技术鉴定出其为一个高抗小麦条锈病的小麦-华山新麦草二体异附加系。在此基础上,本研究利用EMS(甲基磺酸乙酯)对其进行了染色体易位的诱导,并利用原位杂交技术对其M2代进行鉴定和易位系的筛选,以及分析了不同EMS处理浓度对小麦-华山新麦草染色体易位的诱导效应,以期获得小麦-华山新麦草易位系。主要实验结果如下:1、对小麦-华山新麦草衍生后代24-3-1进行农艺性状和抗病性调查,以及利用细胞学观察和原位杂交技术对其进行鉴定,结果显示:根尖有丝分裂中期和花粉母细胞减数分裂中期I观察表明24-3-1的染色体数目为2n=44=22Ⅱ,且遗传性稳定;根尖和花粉母细胞原位杂交表明24-3-1有两条显示黄绿色杂交信号的外源染色体,且能够正常配对。因此证明小麦-华山新麦草衍生后代24-3-1为小麦-华山新麦草二体异附加系,综合性状优良,田间抗病鉴定表现为高抗小麦条锈病。2、对小麦-华山新麦草二体异附加系24-3-1进行EMS诱导,在其M2代利用根尖和花粉母细胞基因组原位杂交(GISH)进行易位染色体的鉴定和筛选。结果显示:在930个M2代植株中,共鉴定了61个含有易位染色体的植株。其中含有1条易位染色体的单株有7个,含有1条易位染色体+1条华山新麦草染色体的单株有5个,含有2条易位染色体的单株有20个,含有3条易位染色体的单株有3个,含有4条易位染色体的单株有26个。含有2条易位染色体和含有4条易位染色体单株的根尖细胞染色体数目分别为2n=42和2n=44,结合根尖和花粉母细胞原位杂交证明含有2条易位染色体的单株和含有4条易位染色体的单株分别为小麦-华山新麦草易位系和小麦-华山新麦草易位-易位附加系。3、分析了不同EMS浓度处理对小麦-华山新麦草染色体易位的诱导效应,结果表明:利用EMS诱导小麦-华山新麦草染色体易位的频率为6.56%;其中0.8%、1.0%、1.2%EMS诱导小麦-华山新麦草染色体易位的频率分别为2.67%、9.33%和11.67%。1.0%EMS处理所获得的M2代易位植株以含2条易位染色体为主,且含易位染色体植株的类型较多,再加之1.2%EMS处理对小麦的个体损伤较大,因此本研究以1.0%EMS作为诱导小麦-华山新麦草染色体易位的最适浓度。4、对M2代含易位染色体的植株进行田间观察和农艺性状调查,结果表明:含易位染色体植株的表型呈现多样性,并出现了具有矮秆、多分蘖、大穗、大粒等优良性状的个体,可作为相应的遗传材料应用于小麦种质改良。
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