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禽传染性支气管炎是由传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus，IBV)引起的鸡的一种急性、高度接触性传染病。该病病原血清型众多，且血清型间交叉保护性差或无交叉保护性，加上不合理的免疫程序，常导致免疫失败，致使该病不能得到有效控制，给养鸡业造成巨大损失。本研究旨在利用水泡性口炎病毒G蛋白修饰的杆状病毒载体表达传染性支气管炎病毒S1蛋白，进行免疫原性的研究，初步的免疫试验表明，重组杆状病毒Ac-V-Sl具有较好的免疫效果。
本研究根据鸡传染性支气管炎病毒M41株的S1基因序列自行设计特异性引物，利用RT-PCR方法扩增S1基因，并将扩增产物克隆到杆状病毒转移质粒pFast-VSV-G-CMV中，获得重组质粒pFast-VSV-G-CMV-S1，然后转化DH10Bac感受态细胞，得到重组穿梭载体Bacmid-CMV-S1，再利用脂质体转染sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒Ac-V-S1。间接免疫荧光试验表明，该重组杆状病毒可以转导哺乳动物细胞并表达S1蛋白。将纯化的重组杆状病毒Ac-V-S1以0.2mL/只(1010pfu/mL)的剂量腿部肌肉注射7日龄SPF雏鸡，21日龄加强免疫一次，一免后7、14、21、28d采血检测ELISA抗体效价和外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的数量。二免后两周用IBV M41强毒进行攻毒保护试验。同时设Prime-boost组（即先免疫Ac-V-Sl，后免疫poly156S1亚单位疫苗），poly156S1亚单位疫苗对照组，商品化灭活疫苗对照组，杆状病毒野毒对照组和PBS对照组。试验结果表明，在体液免疫方面，灭活疫苗组诱导的IBV特异性ELISA抗体水平最高，极显著高于其它试验组(P<0.01)，其次是Prime-boost组和Ac-V-S1组；但在细胞免疫水平方面，Ac-V-S1免疫组表现出较强的优势，免疫水平极显著的高于其它免疫组(P<0.01)，其次是Prime-boost组和杆状病毒野毒对照组。攻毒结果表明，Ac-V-S1、Ac-V-EGFP、poly156S1亚单位疫苗组的保护率分别为55％(6/11)、27％(3/11)、37％(4/11)，而采用Prime-boost组保护率为64％(7/11)，略低于常规灭活疫苗73％(8/11)。表明该免疫策略在诱导细胞免疫水平方面具有较强的优势，可以弥补重组杆状病毒在体液免疫方面的不足，提高重组杆状病毒的免疫效果。