贝莱斯芽孢杆菌CanL-30挥发性有机物活性研究及菌剂研制

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liboliang1985
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芽孢杆菌(Bacillus spp.)是土壤和植物根际的重要微生物成员,具有产生多种抗菌化合物、诱导植物系统抗病性及促进植物生长的能力。本研究以芽孢杆菌Can L-30为研究对象,明确其分类地位;并测定了菌株Can L-30产生的挥发性有机物促进植物生长及诱导植物系统性抗性的活性及机制;制备了一种以芽孢为主要活性组分的Can L-30可湿性粉剂,测定其室内和田间防治油菜黑胫病和菌核病效果,以及对油菜籽产量的影响,取得了如下研究结果:1. 明确芽孢杆菌Can L-30的分类属性,菌株Can L-30属于贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis)。2. 明确菌株Can L-30的基因组特征及包含的抗生物质合成基因簇。发现了12个次级代谢产物合成基因簇,包括合成抗生素macrolactin、difficidin和fengycin等活性物质的基因簇。3. 明确贝莱斯芽孢杆菌Can L-30VOCs促进植物生长和诱导植物抗病性。证实Can L-30 VOCs可显著促进拟南芥和油菜生长,显著增强拟南芥对灰葡萄孢侵染的抗性。鉴定出37种气体成分,包括十一烷和2-十二烷酮等诱导系统抗病性的成分、2-庚酮和2-壬酮等促进植物生长的成分。通过分析Can L-30 VOCs处理拟南芥的转录组数据,并验证基因表达,结果表明:Can L-30 VOCs通过多条激素合成(相应)相关途径调控植物生长及抵抗病菌侵染。4. 建立菌株Can L-30的发酵工艺,配制得到活芽孢含量为1×1011cfu/g的可湿性粉剂,并测定了其防病增产效果。管碟法试验中,可湿性粉剂对油菜黑胫病菌抑菌效果显著,抑菌圈平均直径为3.1 cm;活体接种中,可湿性粉剂抑制上述2种病菌在油菜上的扩展效果显著,抑菌圈平均直径大小分别为0.86 cm和2.6cm。Can L-30可湿性粉剂热贮稳定性为83.33%,悬浮率为98.22%,润湿时间为105s,常温贮存9个月活菌量为1.33×1011cfu/g,符合国家农药质量标准。5. 在湖北省天门市和赤壁市,通过田间小区试验,验证了Can L-30可湿性粉剂的防值油菜菌核病和黑胫病效果,以及对油菜籽产量的增产效果。结果表明:可湿性粉剂对油菜黑胫病菌和核盘菌有显著田间防病效果和提高油菜籽产量的效果。天门市试验点,与对照相比,Can L-30可湿性粉剂对油菜菌核病和黑胫病的平均防效分别为58.1%和50.8%,油菜籽产量平均增产14.4%,与咪鲜胺处理的防效和增产效果没有显著差异。赤壁市试验点,Can L-30可湿性粉剂对油菜菌核病和黑胫病的平均防效分别为51.5%和33.1%,油菜籽产量平均增产11.8%,与咪鲜胺处理的防病效果和增产效果显著提高。
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