干眼患者结膜IL-1β的表达和意义

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研究背景:干眼作为最常见的眼表疾病之一,病因复杂而多样,其临床表现主要有眼红、眼疲劳、眼困、异物感、眼干涩、畏光、流泪等。随着社会进步和经济的发展,环境污染的加重,干眼的发病率明显增高,在我国尤其如此。目前认为年龄、自身免疫性疾病、环境污染、空气干燥和蒸发、空调和电脑的普及、眼部手术、激素缺乏、酒糟鼻、病毒损害、接触镜的佩戴、睑板腺功能障碍等共同构成了干眼的复杂原因。尽管干眼发病率很高,其发病机制却不很明确。近年来免疫学和分子生物学的研究进展使我们对干眼的发病机制有了新的认识,细胞因子作为一类由免疫细胞产生的高活性蛋白质多肽分子,参与了免疫反应和炎症反应,在干眼的发病机制中起到了十分重要的作用。研究发现,眼表面的免疫反应和炎症是影响干眼病情的一个非常重要的因素,SS和KCS患者的结膜、泪腺活检标本内和泪液中均发现炎症细胞浸润及炎症反应标记物表达,尤其是发现白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、细胞间粘附因子(ICAM-1)等含量和表达增加,并和干眼的损害程度成正相关。也有报道细胞因子IL-1β作为一种重要的炎性因子在动物干眼症模型、干眼病人泪液中的表达增加,但在干眼症患者结膜的表达研究则鲜见。因而本实验采用Real-time PCR的方法定量检测干眼症患者结膜IL-1β的基因含量以观察IL-1β在干眼中的表达情况,从而进一步明确IL-1β在干眼发病中的作用。目的:通过测定干眼患者结膜细胞中的IL-1β含量,来探讨IL-1β在干眼发病中的作用。方法:1.选取病例组30例,对照组15例。所有病例组及对照组均做如下临床症状及体征监测OSDI症状评分,BUT,泪液分泌试验(Schirmer1),角膜荧光素钠染色,结膜丽丝胺绿染色。2.印记细胞法收集两组结膜细胞,将纤维素膜浸入RNA裂解液中裂解后,提取RNA,反转录为cDNA, real-time PCR定量检测结膜中IL-1β基因水平表达。3.IL-1β在结膜的含量与临床症状评分等五项指标的相关性分析4.采用SPSS13.0统计软件,计量资料比较用t检验,计数资料用秩和检验,指标间相关性分析采用直线相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.病例组的IL-1β相对基因含量为0.645±0.373(2-△△t),对照组的IL-1β相对基因含量为0.218±0.061(2-△△t),二者比较差异具有统计学意义,(t=5.479,P=0.000)也就是说病例组的IL-1β相对基因含量高于对照组。2.病例组IL-1β的基因表达含量与OSDI评分呈正相关(r=0.809,P=0.000,差异具有统计学意义);IL-1β基因含量表达与Schirmer Ⅰ试验呈负相关(r=-0.434,P=0.034,差异具有统计学意义);IL-1β基因含量表达与BUT呈负相关(r=-0.449,P=0.028,差异具有统计学意义);IL-1β含量表达与角膜荧光素染色(FLS)呈正相关(r=0.582,P=0.003,差异具有明显统计学意义);IL-1β基因含量表达与结膜丽丝胺绿染色(LGs)呈正相关(r=0.482,P=0.017,差异具有统计学意义)。结论:1.IL-1β在干眼患者结膜的基因表达高于对照组,说明IL-1p作为炎性介质参与了干眼的发病。2.IL-1β与OSDI评分呈正相关,与Schirmer Ⅰ试验和BUT呈负相关,说明IL-1β表达高低与干眼病情严重程度相关。3.IL-1β与角膜荧光素染色和结膜丽丝胺绿染色呈正相关,说明IL-1β作为炎性因子既与干眼病情严重程度相关,又参与了眼表的损害。
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