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本文从微滤膜、超滤膜分离青砖茶水提液实验,超滤膜分离青砖茶乙酸乙酯萃取组分实验三方面进行研究,通过对膜分离组分主要活性成分分析及体外相关代谢酶活性的影响,从中筛选出青砖茶对相关代谢酶抑制作用最强的活性组分。1微滤膜分离青砖茶水提液实验研究1.1微滤膜分离青砖茶茶汤主要活性成分分析采用0.45μm、0.22μm微滤膜处理青砖茶茶汤,分析经微滤后茶汤中主要活性成分的含量,结果表明:与青砖茶原茶汤相比,0.22gm微滤液中的茶多酚含量显著下降,0.45μm微滤液和0.22μm微滤液中的氨基酸、可溶性糖、蛋白质、儿茶素、黄酮、茶色素含量变化不明显。1.2微滤膜分离青砖茶茶汤对体外代谢酶活性的影响青砖茶汤、0.45μm、0.22μm膜微滤液对a-淀粉酶具有抑制作用,其IC50分别为11.30mg/mL、11.54mg/mL.12.51mg/mL,茶汤经微滤后,其对α-淀粉酶抑制作用提高不明显。青砖茶各微滤液对脂肪酶均有抑制作用。0.45μm膜微滤液IC50为18.89mg/mL,抑制作用强于原茶汤和0.22μm微滤膜处理茶汤,二者IC50均大于20mg/mL。2超滤膜分离青砖茶水提液实验研究2.1青砖茶超滤液主要活性成分分析在压力为0.05MPa,温度为35℃条件下,用MWCO为1OOKDa、50KDa、30KDa.10KDa、5KDa的超滤膜对青砖茶0.45μm微滤液进行单个超滤和连续超滤处理。在单个超滤实验中,100KDa膜截留液能富集一定的茶黄素和茶红素;50KDa膜截留液有利于可溶性糖、蛋白质、黄酮、茶红素和茶褐素的富集;30KDa膜截留液中氨基酸含量较高,茶多酚和茶褐素含量下降显著;10KDa膜透过液有利于茶红素的富集,蛋白质、黄酮和茶褐素含量下降显著;10KDa膜截留液可富集可溶性糖和茶褐素,茶红素含量下降显著;5KDa膜透过液中茶红素和黄酮含量显著下降;5KDa膜截留液中能有效的富集可溶性糖、茶多酚和茶褐素。五个超滤膜之间相比较,100KDa膜透过液中儿茶素和茶红素的含量最多,50KDa膜截留液中可溶性糖、蛋白质、黄酮、茶红素和茶褐素的含量最多,30KDa膜透过液中氨基酸含量最高,5KDa膜截留液中茶多酚的含量最多。在连续超滤实验中,100KDa膜截留液主要富集茶黄素;50KDa膜透过液有利于氨基酸和茶红素的富集,蛋白、黄酮、儿茶素和茶褐素的含量显著减低;50-100KDa膜截留液能有效的富集可溶性糖和茶褐素,茶红素含量下降显著;30KDa膜透过液能富集氨基酸;10KDa膜透过液有利于茶红素的富集;10-30KDa膜截留液可富集茶褐素;5KDa膜透过液有利于氨基酸的富集,蛋白、茶多酚和茶褐素含量显著下降;5-10KDa膜截留液中黄酮含量显著减低。五个超滤膜之间相比较,50-100KDa膜截留液中可溶性糖、蛋白质、黄酮、茶褐素的含量最多,10KDa膜透过液中儿茶素和茶红素的含量最多,10-30KDa膜截留液中茶多酚的含量最多,5KDa膜透过液中氨基酸含量最高。2.2青砖茶超滤液对体外代谢酶活性的影响青砖茶单个超滤组分对α-淀粉酶和脂肪酶均有抑制作用。对0.45μm微滤液超滤后,不同的超滤膜组分对α-淀粉酶的抑制活性均弱于超滤前。100KDa膜截留液对脂肪酶的抑制作用强于超滤前;其余的超滤组分均弱于超滤前的0.45μm微滤液。青砖茶0.45μm微滤液进行连续超滤分离后得到的所有组分,对α-淀粉酶和脂肪酶均有抑制作用,对α-淀粉酶活性的影响,所有超滤组分的IC50都大于0.45μm微滤液的IC50。对脂肪酶酶活性的影响,100KDa膜截留液的抑制作用最强,其IC50为11.16mg/ml,其余组分都大于0.45μm微滤液的IC50。3超滤膜分离青砖茶乙酸乙酯萃取组分实验研究3.1青砖茶乙酸乙酯萃取物的膜分离组分主要活性成分分析乙酸乙酯层在压力为0.05MPa,温度为35℃条件下,用5KDa的超滤膜组件进行超滤分离。结果表明:与乙酸乙酯萃取物相比,乙酸乙酯萃取物5KDa膜过滤液富集茶褐素的效果显著,其余成分显著下降。乙酸乙酯萃取物5KDa膜截留液富集茶多酚、黄酮和茶褐素的效果极显著,茶黄素含量下降显著。3.2青砖茶乙酸乙酯萃取物的膜分离组分对体外代谢酶活性的影响青砖茶乙酸乙酯萃取物的膜分离组分对a-淀粉酶和脂肪酶均有一定的抑制作用。乙酸乙酯萃取物5KDa膜截留液对a-淀粉酶的抑制作用最强,其IC50为3.88mg/ml。乙酸乙酯萃取物5KDa膜透过液对脂肪酶的抑制作用最强,其IC50为1.71mg/ml。