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低能离子辐照生物技术经历了几十年的发展,已被成功地应用于农作物改良、细胞刻蚀和转基因工程等方面。目前,对其机理的研究多集中在细胞水平上,对分子水平上的辐照损伤如DNA链的断裂、核甘酸和碱基损伤的研究也取得了一定的进展。但关于离子注入对酶蛋白大分子构象及其活性的影响研究还未见报道。
本文应用圆二色光谱技术研究了低能N<+>离子注入和真空作用对辣根过氧化物酶和超氧化物歧化酶二级结构含量的影响,同时测定了不同剂量低能N<+>离子注入和真空作用对酶活性的影响,并对它们的二级结构含量变化与活性之间的关系进行了初步讨论。
研究结果表明:辣根过氧化物酶和超氧化物歧化酶经不同剂量的低能N<+>离子注入和真空处理,酶蛋白二级结构单元的含量及其酶活性都发生了不同程度的改变。它们的变化规律均呈非单调型关系,且对于不同种类酶其变化趋势、程度也完全不同。各种酶的活性变化与其二级结构单元含量存在一定的相关性。低能N<+>离子注入和真空作用均使辣根过氧化物酶的活性增加,活性的增加与其二级结构中β-折叠含量增加存在相关性;低能N<+>离子注入和真空作用均使超氧化物歧化酶的活性增加,活性增加与其二级结构中α-螺旋含量增加存在相关性。
我们认为,低能离子注入生物体,改变了酶蛋白分子构象,从而影响了酶的催化功能,因此产生宏观生物学效应。研究结果为阐明酶蛋白分子结构与功能之间的关系,揭示低能离子注入对生物体的作用机理提供了实验基础和理论支持。