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药品质量是临床用药安全、有效的重要保障。中药复方制剂的成分复杂,传统的单一指标质控方法,已经不能代表中药复方制剂的质量优劣。建立较为全面的中药复方制剂质量控制方法显得尤为重要。目前指纹图谱技术是世界公认的能全面综合控制中药质量的有效手段,它具有信息量大、特征性强、指标多的特点,我国已将该项技术纳入中药注射剂质量标准中,本课题现将该项技术引入中药复方口服固体制剂—舒糖络颗粒的质量研究,借助HPLC/DAD(ELSD)/MS的技术建立了舒糖络颗粒的药材-中间体-终产品的指纹图谱质量评价体系,为舒糖络颗粒临床应用提供了安全、有效的保障。舒糖络颗粒由葛根、黄连、生地、凌霄花、鬼箭羽组成,研究中我们针对这几种药所含成分的不同特点,首先分别采用HPLC-DAD(ELSD)技术分别对各味药材、药材经工艺加工后、中间体和终产品颗粒进行系统的色谱峰研究,找出共有峰确认其成分的药材归属,建立舒糖络颗粒中各味药材、药材经工艺加工后、中间体和终产品颗粒HPLC-DAD(ELSD)指纹图谱。在此基础上,我们又采用了 HPLC-MS技术对各指纹图谱中所获得共有峰的碎片离子进行进一步的结构解析,把对指纹图谱研究从数量研究上升至质量研究,从而为该指纹图谱评价体系的研究提供更加全面、科学的技术支撑。葛根研究结果:葛根药材、葛根药材经工艺加工后经确认均可得到11个(组)共有峰,中间体和颗粒的指纹图谱则可得到15个(组)共有峰。所测得5批药材、药材经工艺加工后、中间体和颗粒的HPLC-DAD指纹图谱的相似度均大于0.9,表明葛根药材、葛根药材经工艺加工后、中间体和颗粒终产品的质量均一、稳定;峰的药材归属显示,葛根药材在经工艺加工后、中间体和颗粒终产品中均有相对应的11个(组)成分得到保留,整个颗粒的制备过程对葛根药材成分的保留情况较好;MS鉴定结果显示,4个环节所共同保留的成分分别为葛根素-4’-O-葡萄糖苷或大豆素-7,4’-二葡萄糖苷、3’-羟基葛根素、3’-羟基葛根素芹菜糖苷、葛根素、3’-甲氧基葛根素、葛根素芹菜糖苷或7-木糖基-葛根素、葛根素芹菜糖苷或7-木糖基-葛根素、大豆苷、葛根苷D、芒柄花苷和大豆苷元。颗粒中间体和颗粒终产品所共同保留的其他几个成分分别为没食子酸、5-(α-D-glucopyranosyloxymethyl)-2-furancarboxaldehyde、毛蕊花糖苷、药根碱或非洲防己碱。黄连研究结果:黄连药材、黄连药材经工艺加工后、中间体和颗粒经确认均可得到7个(组)共有峰。所测的各批的黄连药材、黄连药材经工艺加工后、中间体和颗粒的HPLC-DAD指纹图谱的相似度均大于0.9,表明黄连药材、黄连药材经工艺加工后、中间体和颗粒终产品的质量较为均一稳定;峰的药材归属显示,黄连药材在经工艺加工后、中间体和颗粒中均有7个(组)成分得到归属,但中间体和颗粒终产品中所保留的各成分的量要明显少于原药材和药材经工艺加工后,黄连中的成分损失主要发生在同方中的其他药材共同煎煮、浓缩、干燥制成中间体的过程中;MS鉴定结果显示,4个环节所共同保留的成分为木兰花碱、thalifendine或berberastin、药根碱或非洲防已碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱。中间体和颗粒所共同保留的其他3个成分,分别为葛根素、大豆苷和大豆苷元。生地研究结果:生地药材、生地药材经工艺加工后、中间体和颗粒经确认分别可得到14个、14个、13个和13个共有峰。所测的各批的生地药材、生地药材经工艺加工后、中间体和颗粒的HPLC-DAD指纹图谱的相似度均大于0.9,表明生地药材、生地药材经工艺加工后、中间体和颗粒终产品的质量较为均一稳定;峰的药材归属显示,生地药材经工艺加工后有14个成分得到保留、在中间体和颗粒终产品中均有3个成分得到保留,生地中成分的丢失主要发生在同方中的其他药材共同制成中间体的过程中;MS鉴定结果显示,4个环节所共同保留的成分为5-羟甲基糠醛、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷。中间体和颗粒所共同保留的其他成分,分别为没食子酸、3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、葛根素芹菜糖苷或7-木糖基-葛根素、葛根素芹菜糖苷或7-木糖基-葛根素、大豆苷、葛根苷D、芒柄花苷和大豆苷元。凌霄花研究结果:凌霄花药材、凌霄花药材经工艺加工后、中间体和颗粒经确认分别可得到7个、5个、9个和9个共有峰。所测的各批的凌霄花药材、凌霄花药材经工艺加工后、中间体和颗粒的HPLC-ELSD指纹图谱的相似度结果表明,凌霄花药材、凌霄花药材经工艺加工后、中间体和颗粒终产品的质量较为均稳定;峰的药材归属显示,凌霄花药材经工艺加工后有5个成分得到保留,在中间体和颗粒中均有2个成分得到保留,整个制备工艺对凌霄花中成分的保留情况较差;MS鉴定结果显示,凌霄花药材、药材经工艺加工后、中间体、粒共同保留的成分为毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷。中间体和颗粒所共同保留的其他成分,分别为没食子酸、葛根素、3’-甲氧基葛根素、大豆苷、葛根苷D、芒柄花苷和大豆苷元。鬼箭羽研究结果:鬼箭羽药材和鬼箭羽药材经工艺加工后经确认可以分别得到14个和9个共有峰。所测的各批的鬼箭羽药材、鬼箭羽药材经工艺加工后的HPLC-DAD指纹图谱的相似度较好,表明鬼箭羽药材、鬼箭羽药材经工艺加工后的质量较为均一稳定;峰的药材归属显示,鬼箭羽药材经工艺加工后共有6个成分得到保留。由于鬼箭羽药材成分的响应较低,鬼箭羽中成分被其他药材成分所掩盖,无法进行指认。MS鉴定结果显示,鬼箭羽药材、药材经工艺加工后、中间体、颗粒共同保留的2个成分为没食子酸和儿茶素或表儿茶素的二聚物。中间体和颗粒另外所含相对应的11个成分,分别为3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、葛根素芹菜糖苷或7-木糖基-葛根素、大豆苷、染料木苷、染料木素7-O-β-D-呋喃芹糖基-((1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、大豆苷元和小檗碱。