贵州香菇菌棒腐烂病病原真菌鉴定及发生规律初探

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贵州省将食用菌作为助力脱贫攻坚的支柱产业之一,香菇(Lentinus edodes)由于经济效益良好作为贵州食用菌种植的主要品种之一,而在其栽培过程中菌棒腐烂现象十分普遍,导致其产量及品质都受到严重影响。香菇菌棒腐烂病发生广泛,危害严重,关于该病害的综合防治技术缺乏。因此,本论文从贵州5个食用菌基地进行病害调查,分离鉴定香菇菌棒腐烂的病原菌,研究病原菌对香菇菌丝的侵染及抑制作用,初步探究香菇菌棒腐烂病的发生条件,以期为该病害的防治研究奠定理论基础。研究结果如下:1.病原菌分离与鉴定:从贵州省贵阳市、安顺市以及黔东南州5个香菇生产基地腐烂菌棒培养料中分离43株抑制香菇菌丝生长的菌株,结合形态学特征与分子生物学(ITS、TEF1-α以及RPB2序列)鉴定为5种木霉菌(Trichoderma),保存于贵州省菌种保藏中心,编号GZCC21-0004—GZCC21-0008;分别为Trichoderma lentinulae、Trichoderma atroviride、Trichoderma hirsutum、Trichoderma virens以及Trichoderma breve,其中T.lentinulae在五个基地均有分布,该菌为2018年报道的新种,且在平菇培养料及竹荪子实体中也有分布,是贵州食用菌侵染木霉菌优势菌株。2.病原菌侵染与抑制香菇菌丝作用:通过载玻片对峙实验首次发现T.lentinulae侵染香菇菌丝详细过程:(1)贴附生长;(2)缠绕包裹;(3)分泌色素;(4)顶端破裂;(5)中空、皱缩。木霉菌的代谢物与挥发物抑制实验结果显示GZCC21-0004—GZCC21-0008的代谢物对香菇菌丝抑制率分别为:28.79%、57.12%、50.91%、17.73%、30.30%,挥发物的抑制率较高,分别为:84.31%、81.57%、82.35%、76.65%以及56.86%。3.GFP标记木霉菌侵染香菇菌丝观察:经过潮霉素耐受度测定,将野生型木霉菌株T.lentinulae与含GFP的农杆菌psk2251共培养,经过大量筛选,成功地将GFP转入木霉菌株T.lentinulae,并获得能稳定遗传的标记木霉菌株GFP20-1,但对峙实验观察结果并不明显。4.香菇菌棒腐烂病发生条件:研究温度以及pH值变化对5株木霉菌以及香菇菌丝生长影响,结果发现香菇菌丝最佳生长温度在26℃,超过26℃菌丝生长速率开始下降,超过36℃菌丝极为缓慢;GZCC21-0004—GZCC21-0008菌丝最佳生长温度为28℃,超过28℃菌丝生长速率降低,超过40℃菌丝停止生长;木霉菌对香菇菌丝生长覆盖率随温度升高而增高;且高温处理能够促进木霉菌丝生长,分生孢子浓度以及萌发率增高;木霉菌的p H耐受度比香菇菌高,最适生长p H值为6,而香菇菌丝最适生长p H值为5。
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