【摘 要】
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目的:探究绞股蓝皂苷对小鼠心肌缺血再灌注的保护作用及其机制方法:本实验分别构建了心肌细胞氧化损伤模型和小鼠缺血再灌注模型,分别为予以小鼠心房肌细胞系HL-1 600μM的H2O2处理12h和予以C57/B6小鼠冠脉左前降支结扎30min后再灌注手术。体外实验部分绞股蓝皂苷组细胞予以12.5μM和25μM药物预处理12h;体内实验部分绞股蓝皂苷组小鼠予以100mg/kg药物灌胃3d,同模型组造模后继
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目的:探究绞股蓝皂苷对小鼠心肌缺血再灌注的保护作用及其机制方法:本实验分别构建了心肌细胞氧化损伤模型和小鼠缺血再灌注模型,分别为予以小鼠心房肌细胞系HL-1 600μM的H2O2处理12h和予以C57/B6小鼠冠脉左前降支结扎30min后再灌注手术。体外实验部分绞股蓝皂苷组细胞予以12.5μM和25μM药物预处理12h;体内实验部分绞股蓝皂苷组小鼠予以100mg/kg药物灌胃3d,同模型组造模后继续予以药物灌胃3d。体外实验部分检测了HL-1的CCK8、LDH、细胞凋亡、胞内ROS和线粒体膜电位;体内实验部分取小鼠心脏做HE染色、Masson染色和TUNEL染色,提取心脏中的细胞检测线粒体膜电位,检测中性粒细胞和巨噬细胞的比例。细胞和心脏梗死组织都通过WB和RT-q PCR实验检测了NF-κB通路激活情况,检测了中p65和p-p65的蛋白表达和下游炎症因子IL-6、IL-1β及TNF-α的m RNA表达。结果:体外实验部分绞股蓝皂苷能保护HL-1,提高细胞活性,减少LDH释放,减少细胞凋亡比例,其机制可能与减少胞内ROS生成、恢复线粒体膜电位有关。体内实验部分绞股蓝皂苷能减少小鼠心肌缺血再灌注后心肌面积,减少心肌排列紊乱、空泡变性等病理改变,减少心肌细胞凋亡,恢复了心肌细胞线粒体膜电位,减少了心肌中中性粒细胞浸润,减少了巨噬细胞的激活。WB和RT-q PCR实验显示绞股蓝皂苷能减少HL-1和心肌中NF-κB通路激活,减少p-p65的表达及炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的表达。结论:绞股蓝皂苷能明显减少小鼠心肌缺血再灌注后心肌细胞的凋亡,缓解MIRI,其机制可能是绞股蓝皂苷减轻了细胞线粒体膜电位的降低,保护了心肌细胞,同时抑制了NF-κB通路的激活,减少了中性粒细胞的浸润和M1巨噬细胞的分化,从而减轻了局部炎症,减少了MIRI。
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