胶质瘤是最常见的颅内恶性肿瘤,侵袭能力极强,具有发病率高、复发率高、病死率高和治愈率低“三高一低”的特点,且预后很差,术后中位生存时间仅14.6个月。目前,新的药物及治疗手段的发展并未能被证明可显著延长患者的生存时间。因此,寻找新的治疗靶点和策略是改善胶质瘤患者预后的重要思路。在此临床治疗现状下,本研究拟通过探索新的对胶质瘤恶性行为学具有重要调控作用的分子,并通过离体及在体实验的方法证明其对胶质瘤细胞恶性行为学调控的具体作用,且进一步对其调控胶质瘤恶性行为学的可能机制进行初步的探索,为寻找新的胶质瘤治疗的潜在靶点打下基础。本研究通过四个部分的实验对长链非编码RNA(Long noncoding RNAs,LncRNAs)LncRNA-GAS5参与对胶质瘤恶性行为学的调控作用及可能机制进行了证明和阐述:包括收集临床肿瘤标本,检测其中GAS5的表达,并与临床及预后资料进行Cox回归分析及生存分析以明确GAS5与胶质瘤患者临床预后的相关性;在不同的胶质瘤细胞系中过表达GAS5,使用CCK-8、流式细胞、划痕实验、Transwell迁移实验等方法检测细胞的增殖、凋亡和迁移;进行原代胶质瘤干细胞诱导培养,过表达GAS5,使用克隆球形成实验、干细胞标记物的表达检测、CCK-8、Edu染色等技术,检测GAS5对胶质瘤干细胞(Glioma stem cells,GSCs)“干性”及细胞自我更新的调控作用;通过RAP实验筛选与GAS5作用的目标基因并进行PCR验证,进一步筛选出与GAS5表达相关的基因,之后通过Starbase网站预测下游靶基因,并通过PCR、Western Blot、报告基因及挽救实验进一步研究GAS5调控GSCs恶性表型的机制。上述四部分研究的结果显示,胶质瘤组织中GAS5的表达与肿瘤的恶性程度成负相关,与患者术后的生存时间成正相关;过表达GAS5可抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移,并促进其凋亡;过表达GAS5可削弱胶质瘤干细胞的“干性”及自我更新;其机制可能通过保护let-7e/miR-125a的共同宿主基因SPACA6不被降解,通过let-7e/miR-125a的共同作用及其共同下游IL-6R/STAT3通路,达到抑制胶质瘤细胞增殖和迁移的作用,使用let-7e inhibitor或/和miR-125a inhibitor可以部分/完全抵消GAS5的作用。基于以上结果,我们得出以下结论:GAS5的低表达与较高的肿瘤恶性程度及较差的术后生存时间有关;GAS5对于胶质瘤细胞及胶质瘤干细胞的恶性生物行为均有负性的调控作用;其下游机制可能通过抑制SPACA6降解,达到上调let-7e和miR-125a表达的作用,进而通过其下游IL-6R/STAT3通路实现对胶质瘤恶性行为的负性调控作用。本研究的结果为寻找新的胶质瘤的分子诊断和治疗的潜在靶点提供了理论依据,具有临床转化意义和应用价值。