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背景二甲双胍(Metformin、Met)作为临床常用的一线降血糖药物,不良反应小,安全性好,对正常人无明显降血糖作用。最近大量研究发现二甲双胍可以抑制多种肿瘤细胞的生长,也有研究发现二甲双胍可以增加一些放化疗药物的敏感性,其抗肿瘤机制大多是通过激活与腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase、AMPK)相关的信号通路,从而抑制蛋白质的翻译和诱导细胞的凋亡。而二甲双胍在抗食管癌方面鲜少研究。目的探讨二甲双胍对食管鳞癌EC-109细胞的增殖抑制作用及对联合顺铂(DDP、 cisplatin)化疗的增敏作用,并初步探讨其分子机制,为二甲双胍联合顺铂治疗食管癌提供理论依据。方法1.食管鳞癌EC-109细胞分为四组：空白对照组(A)、Met组(B)、DDP组(C)、Met+DDP组(D),其中B组设有5个浓度组(B-a 5 mmol/L、B-b 10 mmol/L、B-c 20 mmol/L、B-d 40 mmol/L、B-e 80 mmol/L),C组设有2个浓度组(C-a 4.17 μmol/L、C-b 8.33μmol/L),D组Met浓度均为5 mmol/L(联合a组、联合b组)。2.四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定不同时间段(24 h、48 h、72 h)的细胞增殖抑制率,并计算二甲双胍作用的IC50值,选用5 mmol/L的二甲双胍浓度作为后续实验的浓度。3.流式细胞仪检测各实验组作用48 h后对细胞周期的影响。4. Real Time-PCR法测定各组细胞作用48 h后的p21和JNK1的RNA表达情况；Western Blot法检测各买验组细胞作用48 h后的p21和JNK1的蛋白表达情况。(其中第3、4步实验中的分组为：A组、B-a组、B-c组、C-a组、联合a组,分别另命名为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组)结果1.MTT结果显示：B组,在同一时间点,不同浓度的二甲双胍对细胞的增殖抑制率均显著高于空白对照组(P<0.05),且呈浓度依赖性(P<0.05)；在二甲双胍各浓度组内,作用48 h、72 h后的细胞增殖抑制率均高于作用24 h后(P<0.05),作用72 h后的细胞增殖抑制率均高于作用24 h、48 h后(P<0.05)。联合a组和联合b组作用24 h、48 h、72 h后对细胞的增殖抑制率均高于同时间段5 mmol/L·Met组和单药顺铂组(P<0.05)；同一时间点联合a组与联合b组比较有统计学差异(P<0.05)。2.流式细胞仪检测细胞周期,结果显示二甲双胍联合或不联合顺铂可诱导EC-109细胞周期阻滞在G1、S期,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。3. Real Time-PCR结果显示：以GAPDH为内参,与Ⅰ组比较,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V组的p21基因表达明显上调,且Ⅴ组的p21基因表达上调较Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组明显(P<0.05)；与Ⅰ组比较,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组JNK1基因表达上调,但Ⅴ组的JNK1蛋白表达明显下调(P<0.05)。4.Western Blot结果显示：与Ⅰ组比较,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组的p21蛋白表达明显上调,且V组的p21蛋白表达上调较Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组明显(P<0.05)；与Ⅰ组比较,Ⅱ、Ⅳ组JNK1蛋白表达上调,但Ⅲ、Ⅴ组的JNK1蛋白表达下调(P<0.05)。结论二甲双胍对食管鳞癌EC-109细胞的增殖具有抑制作用,且呈时间浓度依赖性；二甲双胍可以增加EC-109细胞对顺铂化疗的敏感性；二甲双胍联合或不联合顺铂作用于EC-109细胞后,细胞周期大部分阻滞在G1、S期；二甲双胍对EC-109细胞发挥顺铂化疗增敏作用,其机制是通过p21/JNK1信号通路起作用。