聚乙烯聚吡咯烷酮吸附纯化竹叶黄酮与提高黄酮脂溶性的工艺研究及应用

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竹叶中的黄酮类物质具有抗氧化、抗活性氧自由基和改善心血管系统以及抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、调节血脂等生理活性,已经受到国内外市场的广泛关注。本文建立纯化竹叶黄酮的新方法,以得到安全、高含量的竹叶黄酮,并用包埋法提高黄酮脂溶性,同时评价了黄酮在植物油中的抗氧化能力。首先,利用聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)对酚类物质选择性吸附的特性,对竹叶黄酮溶液进行纯化,并对其工艺条件进行优化。其最佳工艺条件为:最佳上样浓度10 mg·mL-1,最佳径高比为1:1.9,吸附洗脱流速0.33 mL·min-1,洗脱时先用1BV的蒸馏水洗脱,再以800 mL 70%的乙醇溶液洗脱。按照最佳吸附洗脱条件,分段接收黄酮洗脱液,收集洗脱液体积80~560 mL的馏分,黄酮的含量大于90%;收集洗脱液体积80~480 mL的馏分,黄酮的含量大于95%,转移率为63.5%。用再生的PVPP纯化黄酮,按照最佳吸附洗脱条件,分段接收黄酮洗脱液,收集洗脱液体积80~560 mL的馏分,黄酮的含量大于90%;收集洗脱液体积160~480 mL的馏分,黄酮的含量大于95%,转移率为61%。其次,采用月桂酸单甘酯作为包埋材料,司盘80作为乳化剂,制备脂溶性的黄酮包埋物,并对其工艺条件进行优化,以清油为空白,油在760 nm处的吸光度作为指标,吸光度越小,说明混浊度越小,黄酮的油溶性越好。其最优条件为:乳化时间30min,乳化温度50 ℃,95%乙醇10 mL,司盘80质量分数为0.4%,乳化速度为1700 r.min-1,旋蒸温度为50 ℃,旋蒸速度为120 r.min-1,载药量为11.1%,即月桂酸单甘酯与黄酮质量之比为8:1。在此条件下,当黄酮在油中的浓度为0.02%时,油的吸光度为0.027A,黄酮油溶液的混浊度最小,油溶性最好。再次,采用硬脂酸单甘酯作为包埋材料,以上述最佳工艺条件制备黄酮包埋物,考察了黄酮的含量以及黄酮萃取液中的固形物含量对黄酮包埋物的油溶性的影响。结果表明黄酮含量越高,固形物含量越小,其混浊度越小,油溶液越澄清;黄酮含量越低,固形物含量越高,混浊度越大。实验还考察了黄酮萃取液中的有机溶剂对黄酮包埋物的油溶性的影响,研究结果表明,去除黄酮萃取液的有机溶剂有利于提高黄酮包埋物在油溶液中的溶解性。最后,评价了溶有不同含量的黄酮的油溶液的抗氧化能力,比较了经过离心和未离心的黄酮油溶液的过氧化值,结果表明未离心的黄酮包埋物的油溶液的过氧化值低于离心的油溶液,而在没有离心的黄酮油溶液中,添加了黄酮包埋物的油溶液的过氧化值比未添加的油溶液的过氧化值低,且黄酮在油中的浓度为0.02%时,过氧化值最小,抗氧化效果最佳。
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