目的:构建截短型人转化生长因子βⅡ型受体胞外域（truncated extracellular domain of human transforming growth factor-beta receptor type Ⅱ,thTβRⅡ）原核表达载体,诱导表达纯化thTβRⅡ蛋白,并分析其生物学活性。方法:以本实验室前期构建的pGEX-4T1-TβRⅡ（TGF-βⅡ型受体全长基因片段）为模版,常规PCR扩增出带有NdeI和BamHI酶切位点的th TβRⅡ目的基因,并插入原核表达载体pET28a,重组质粒命名为pET28a-thTβRⅡ。将经过PCR、双酶切鉴定,并送DNA测序正确的pET28a-thTβRⅡ转化至大肠杆菌Rossta诱导表达,用Ni²⁺亲和层析纯化获得高纯度thTβRⅡ目的蛋白,经SDS-PAGE进行纯度分析,MTT比色法检测其对TGF-β1活化的人肝星状细胞LX-2增殖活性的影响,real-time RT-PCR及Western blot分别检测其对TGF-β1mRNA、FNmRNA;FN蛋白、α-SMA蛋白表达的影响。结果:pET28a-thTβRⅡ原核表达载体构建成功,宿主菌Rossta/pET28a-thTβRⅡ在37°C经0.8 mmol/L IPTG诱导5 h获得目的蛋白thTβRⅡ的大量表达,目的蛋白主要以包涵体的形式存在,通过Ni²⁺亲和层析,透析变复性后成功获得高纯度thTβRⅡ蛋白,SDS-PAGE鉴定分子量约为18.0 kDa,MTT显示150μg/m L的重组蛋白thTβRⅡ能明显抑制活化的人肝星状细胞LX-2增殖,real-time RT-PCR及Wstern blot显示200μg/mL的重组蛋白thTβRⅡ其能显著减少TGF-β1 mRNA、FNmRNA;FN蛋白、α-SMA蛋白的表达。结论:成功构建pET28a-thTβRⅡ原核表达载体,诱导表达纯化并获得高纯度重组蛋白thTβRⅡ,其能抑制活化的LX-2细胞增殖并具抑制纤维化相关因子表达的作用,为进一步体内外功能研究打下基础。