背景胃癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一,由于其早期症状不明显,缺乏特异性诊断指标,往往发现时已属于中晚期,因此,寻找胃癌早期诊断特异性标志物,是提高胃癌患者早期诊断和改善患者远期生存期的关键。亮氨酸拉链EF-hand结构域跨膜蛋白1(Leucine zipper/EF-hand Containing Transmembrane protein 1,LETM1)是一种线粒体内膜蛋白,位于人类4号染色体断臂,LETM1影响线粒体功能,从而影响细胞代谢。课题组前期研究显示LETM1在胃癌组织中表达升高,但其对胃癌细胞功能的影响及其机制尚不明确。目的研究亮氨酸拉链/EF-hand含跨膜蛋白1(LETM1)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其发挥作用的机制。方法(1)通过RT-PCR和免疫印迹分析(Western blot)检测正常胃粘膜上皮细胞(GES1)和胃癌细胞系(MGC-803、AGS、MKN-45)中LETM1在m RNA和蛋白水平的表达差异;(2)选取LETM1表达相对较高的胃癌细胞系(MKN-45),转染干扰RNA使LETM1在MKN-45细胞中低表达;选取LETM1表达相对较低的细胞系(MGC-803),转染LETM1过表达质粒使其在MGC-803细胞中过表达;利用RT-PCR和免疫印迹分析(Western blot)检测转染效率;(3)进而利用CCK-8实验测定LETM1低表达及过表达后胃癌细胞的增殖能力、细胞划痕实验评估LETM1低表达及过表达后胃癌细胞的迁移能力、Transwell侵袭实验评价LTEM1低表达及过表达后胃癌细胞的侵袭能力。同时,利用流式细胞术检测LETM1低表达及过表达对胃癌细胞凋亡的影响;(4)最后通过Western blot检测低表达及过表达LETM1后PI3K/Akt信号通路上相关蛋白的变化。结果(1)在m RNA和蛋白水平,正常胃黏膜上皮细胞(GES1)中LETM1的表达水平显著低于胃癌细胞系(MGC-803、MKN-45、AGS)。(2)敲减LETM1可以显著抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,促进胃癌细胞的凋亡;(3)过表达LETM1能够促进胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,同时抑制胃癌细胞的凋亡(4)LETM1的生物学调控作用依赖于PI3K/Akt信号通路的激活。结论LETM1是一种致癌基因,通过PI3K/Akt信号通路促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭。因此,LETM1可能成为胃癌诊断和治疗的潜在靶点。