水稻转录因子OsWRKY68蛋白质的表达特征及其功能研究

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水稻(Oryza sativa L.)是人类最主要的粮食作物之一,WRKY转录因子是水稻中最大的转录因子家族之一。水稻中有近百个WRKY转录因子家族成员,每个WRKY转录因子都有其特定的编号和功能。本实验室前期发现OsWRKY68蛋白质在水稻接种白叶枯病菌后诱导表达,在叶片中组成型表达。温度、干旱和盐等非生物逆境严重危害水稻的生长和产量,研究水稻WRKY转录因子的功能对了解水稻生长发育、抗病抗逆机理等具有重要的理论意义和应用价值。本研究利用OsWRKY68蛋白质特异抗体,通过免疫印迹技术调查了OsWRKY68蛋白质在水稻正常生长发育、非生物胁迫和激素处理条件下的表达特征,发现OsWRKY68蛋白质在水稻正常生长发育过程中基本呈组成型表达,分子量约为32 kD,和预测理论值大小相符。在盐胁迫和恒暗处理后OsWRKY68蛋白质的表达丰度随时间延长持续下降。恒光、茉莉酸甲酯和乙烯利处理后,诱导了分子量较大的OsWRKY68~+的表达,且表达丰度随时间延长逐渐增加。对OsWRKY68 RNAi转基因水稻进行PCR和WB鉴定,观察转基因水稻的表型并分析其农艺性状。通过鉴定,获得了4个阳性的OsWRKY68 RNAi转基因株系(Y316、Y317、Y326和Y337),且转基因水稻的株高、分蘖数和结实率等显著降低。对转基因水稻进行耐盐试验,发现盐胁迫处理后,转基因株系的根长、鲜重及存活率均显著高于野生型。OsWRKY68蛋白质在水稻正常生长发育过程中发挥作用,下调OsWRKY68蛋白质的表达影响水稻的正常生长。OsWRKY68蛋白质的表达丰度受盐、黑暗、光照、茉莉酸甲酯和乙烯利的调控。下调OsWRKY68蛋白质的表达提高了水稻的耐盐性。
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