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目的:胃癌是当今世界最常见的恶性肿瘤之一,早期发现影响胃癌预后的重要因素并采取有效的措施进行干预能够降低胃癌患者死亡率,目前很多研究发现胃癌中相关microRNA(miRNA)表达发生变化,证实其与胃癌患者的生存预后有很密切的关系。我们通过筛选获得胃癌组织相对于癌旁正常组织具有显著差异表达的miRNA,并构建一个miRNA特征谱,以此研究其与胃癌患者生存预后的关系。方法:我们采用美国LC实验室的双色标记microRNA芯片,筛选5对胃癌组织相对于癌旁正常组织中具有显著差异表达的miRNA。收集2005年1月到2006年10月上海长征医院行根治性手术的胃癌石蜡标本110例,随机分为测试组和验证组,两组病例各为55例。然后利用荧光实时定量PCR检测验证55例测试组胃癌石蜡组织标本中相关miRNA表达的变化,通过验证,将胃癌组织相对于癌旁正常组织中具有显著差异表达的miRNA作为单因素分析变量纳入COX回归模型,筛选与胃癌患者生存预后相关的miRNA。由于目前世界范围内缺乏能够预测胃癌患者生存的特异性指标,为了较全面、准确的判断胃癌患者的预后,我们通过构建一个由胃癌预后相关miRNA组成的风险特征谱,以中位风险值为临界点区分高低风险miRNA特征谱,利用Kaplan Meier生存分析研究其对胃癌总体生存及无病生存时间的预测价值。将年龄、性别、肿瘤分化程度、病理分期、肿瘤大小及miRNA风险特征谱作为研究变量纳入多因素Cox回归分析模型,研究影响胃癌患者生存预后的独立危险因素。再次利用55例验证组病例验证miRNA风险特征谱对胃癌患者生存预后的独立预测价值。另外,对不同病理分期、分化程度及肿瘤大小进行分层后,研究miRNA风险特征谱与胃癌生存预后的关系。结果:通过miRNA基因芯片筛选获得了7种差异表达的miRNA(5对胃癌标本中4对以上表达差异超过2倍以上),其中5种在胃癌组织中高表达(miR-21,miR-181d,miR-181a-1,miR-181a-2,miR-224),2种在胃癌组织中低表达(let-7g,miR-148a)。利用实时定量PCR验证55例测试组胃癌患者以上7种miRNA表达变化,我们发现,相对于癌旁正常组织,其中6种miRNA在胃癌组织中表达有显著差异,两种高表达(miR-21,miR-181a-1),四种低表达(miR-181a-2,miR-148a,let-7g,miR-181d)。单因素Cox回归分析发现其中3种miRNA表达变化与胃癌生存预后有关(miR-21高表达;miR-181a-2,miR-148a低表达)。由3种miRNA组成的风险特征谱能够有效的预测胃癌患者的生存预后,表达高风险miRNA特征谱的胃癌患者总体生存及无病生存时间较短;相反,表达低风险miRNA特征谱的胃癌患者生存时间较长。多因素Cox回归分析显示miRNA风险特征谱是影响胃癌生存预后的独立危险因素。另外55例验证组病例检测证实由3种miRNA组成的风险特征谱是胃癌生存预后的独立危险因素。最后我们通过分层分析,发现miRNA风险特征谱是独立于病理分期、分化程度及肿瘤大小的能够预测胃癌预后生存的重要因素结论:相对于癌旁正常组织,3种miRNA(miR-21,miR-181a-2,miR-148a)在胃癌组织中表达有显著性差异,并且与胃癌患者生存预后显著相关。由3种miRNA组成的风险特征谱能更全面、有效的预测胃癌患者的总生存及无病生存时间,更是胃癌生存预后的独立危险因素。