【摘 要】
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细胞内存在着多种不同的核酸酶，但在目前已知的核酸酶中，既可以降解DNA，又具有耐热特性的DNA酶还未见报道。本实验利用DEAECellulose-52离子交换层析、SephadexG-75凝胶过滤层析
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细胞内存在着多种不同的核酸酶，但在目前已知的核酸酶中，既可以降解DNA，又具有耐热特性的DNA酶还未见报道。本实验利用DEAECellulose-52离子交换层析、SephadexG-75凝胶过滤层析等蛋白质纯化技术，成功的从孵化至5天的家蝇幼虫中分离提纯得到一种新的耐高温且具有DNA酶活性的蛋白质。
通过SDS-PAGE测定，提纯的蛋白分子量约为58kDa，称之为LP58(1arvaprotein58)。经等电聚焦电泳测定，其等电点(pI)约为4.6。LP58在100℃煮沸处理12min后仍具有酶的活性，证明其具有耐高温的特性；取纯化得到的LP5819μlLP58(0.6876mg/ml)分别与1μl的pGEM3ZF(-)(2.67mg/ml)质粒和1μl的鸡基因组(0.3453mg/ml)DNA37℃作用30分钟，经琼脂糖电泳检测其既能降解质粒，又能降解染色体DNA，推测LP58可能既具有内切活性，又具有外切活性。测得酶比活力为200U/mg(酶活力单位：37℃,30分钟，每降解1μg质粒所需要的酶量定义为1个活力单位U)。
将经过DEAECellulose-52离子交换层析和SephadexG-75凝胶过滤层析纯化的LP58进行双向电泳，转到PVDF膜上，进行测序，测得其N端6个氨基酸序列为"Y-A-D-Y-D-F"。
此外，以LP58为抗原免疫豚鼠制备该蛋白的抗体，利用琼脂双向双扩散法测得血清效价为1：32；利用Westernblot杂交技术证实其能够与家蝇幼虫蛋白(抗原)特异性结合，为LP58的免疫检测鉴定和生物学功能研究奠定了基础。
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